正常滑膜细胞原代培养 实验材料： 1. 实验动物：大鼠、兔，人手术切除的关节等； 2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1time，添加100IU/ml青霉素、100g/ml链霉素，pH7.2； 3. 培养液：RPMI1640培养基，补加15%小牛血清； 实验方法： 1. 将大鼠处死后，用75%酒精消毒...

正常人骨膜内成骨细胞原代培养 实验材料： 1. 骨组织来源：手术切除之骨组织； 2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1time，添加100IU/ml青霉素、100g/ml链霉素，pH7.2； 3. 消化液：0.25%胰蛋白酶溶液，1mg/mlⅠ型胶原酶溶液； 4. 培养液：RPMI 1640培养基，配制培养...

原代悬浮细胞吉姆萨染色法 涂片法： 1. 用含有5%10%血清的等渗液将培养的细胞调制成密度为106个/ml的细胞悬液； 2. 将1滴细胞悬液滴于一张载玻片的一端，用另一块干净的载玻片，按照血液涂片法将细胞铺展于载玻片上； 3. 载玻片在空气中干燥后，再用甲醇固定...

正常人关节软骨细胞的长期培养 实验材料： 1. 软骨细胞来源：2024周自然流产胎儿的股骨和胫骨； 2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1time，添加100IU/ml青霉素、100g/ml链霉素，pH7.2； 3. 消化液Ⅰ：2mg/ml胰蛋白酶和2mg/ml胶原酶混合消化液，用液配制； 4. 消化液...

正常关节软骨细胞的短期培养 实验材料： 1. 软骨细胞来源：动物材料可选用未成年兔的膝关节、鸡胚胸软骨。人体材料可取自引产胎儿或成年人手术切除的软骨标本； 2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1，添加100IU/ml青霉素、100g/ml链霉素，pH7.2； 3. 消化液：0.2%胶...

台盼蓝染色法 材料： 1. 显微镜、玻片、盖玻片、滴管； 2. 试剂：0.4%台盼蓝染液； 3. 台盼蓝（Trypan blue）：0.4g； 4. 生理盐水：100ml； 操作步骤： 1. 用Hanks液配制0.1%台盼蓝溶液； 2. 用0.5%胰蛋白酶：0.2%EDTA=1：1混合液来消化培养的贴壁细胞； 3....

细胞内糖类染色方法过碘酸席夫反应法 基本原理： 过碘酸是一种强氧化剂，过碘酸的氧化作用先使糖分子的乙二醇基变为乙二醛基，乙二醛基继而与Schiff试剂结合，Schiff试剂本为无色亚硫酸品红复合物，但它与乙二醛基结合后形成紫红色反应物。颜色反应的深浅取决...

原代贴壁细胞吉姆萨染色法 染液制备： 1. 称取0.5g吉姆萨粉和22ml甘油； 2. 取少量甘油与吉姆萨粉在研钵内充分混合，研磨至无颗粒； 3. 将剩余的甘油倒入研钵，于56℃保温2h； 4. 加入33ml纯甲醇混匀，即为吉姆萨母液，将其保存于棕色试剂瓶内； 5. 取9份pH6....

原代细胞骨架的染色方法 微丝的显示方法步骤： 1. 用液漂洗盖片培养的原代细胞3次，每次30s； 2. 用2%的甲醛/液固定原代细胞3min； 3. 用0.5%的三硝基甲苯/处理3次，每次10min； 4. 漂洗3次； 5. 用罗丹明（rhodamine）标记的鬼笔环肽（phalloidin）（1：10）...

原代细胞的脂类染色方法苏丹红Ⅲ染色法 原理： 苏丹红染料在脂类物质中的溶解度大于其在溶剂中的溶解度，如果染料与含有脂类的试样接触，便有大量染料进入脂类物质的结构内，使这些结构呈红色。多用苏丹红染料、油红O、尼罗蓝等溶于脂类的染料染色，使脂质呈...