Percoll密度梯度离心分离法： 1、Pcrcoll混悬液的配制：Percoll 90ml,HBSS 9ml, HEPES(0.25mol/l)1ml(PH 7.3),HCL(1mol/l)0.4ml 调节至PH7.4 2、制备Percoll密度梯度管 密度 Percoll/HBSS(ml/ml) 1.070 24:20 1.079 27:15.9 1.088 23:10 3、加分层液的顺序：...
取引产胎儿肾，无菌操作，1小时内完成。2用生理盐水冲洗干净。 取肾皮质，用小外科剪剪成碎麽。依次研磨过80目，100目，200目筛网，不断用生理盐水冲洗，最后在200目筛网上收集肾小球， 先用0。4%的胶原酶四消化半小时，接种于50ML的培养瓶里，加含有20%小牛...
一、配制用水培养基的大部分是水，所以水的质量直接影响培养基的质量。按Waymouth标准，水的电阻应为200万欧姆，一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。 二、培养基培养基有天然、人工两种。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基...
肿瘤细胞对培养基的要求不如正常细胞严格，一般常用RPMI、DMEM、McCoy-5A等培养基，血清浓度不高，10%即可，建议最好在原代培养时能加入生长因子或原患者血清（1%-2%）以利细胞生长。培养方法很多，主要有组织块法、酶消化法、钽网法、脱落细胞法等。 1.组织...
体外培养的细胞受到严重污染时，有时即使想尽各种办法也难以挽回。因此，防止污染，预防是关键。只有将预防措施贯穿于整个细胞培养的始终，才能将发生污染的可能性降到最小程度。一般预防可从以下几方面着手： 1、从物品、用品消毒灭菌着手 细胞培养所用物品...
胶质瘤是颅内最常见的肿瘤，病因不清。切除后容易复发，放射治疗和化疗效果不理想。近年来从成年的脑组织中可以培养出神经干细胞，传统的观点认为，胶质瘤中只含有胶质细胞，没有神经元。近期的研究证明，胶质瘤在体外分化为神经元和星形胶质细胞，证明了胶质...
实验材料 12.5d孕鼠、PBS、DMEM、血清、酒精、双抗、解剖器、培养箱、超净台 实验步骤 1.性成熟小鼠合笼（♀∶♂=2∶1） 2.每天观察小鼠，见阴道栓后确定为怀孕0.5d。 3.取12.5d孕鼠，断颈处死，在酒精中泡数秒消毒。控干酒精后置于一个无菌的培养皿中。 4.无...
准备工作 （1）试管、试管架、滴管、吸管、小鼠固定架、玻璃瓶、玻璃皿、烧杯、橡皮头、剪刀、镊子、纱布、棉球、酒精灯、滴管、移液器、细胞计数器、生理盐水、PBS、双抗（青链霉素）、75%酒精、95%酒精、培养瓶（50ml，260ml）。 （2）BALB/C小鼠（4~5周龄...
从孕17-18天的雌鼠的胎儿分离神经元细胞。孕雌鼠麻醉然后解剖，胎儿收集到HBSS-1中然后快速断头。剥离脑膜和白质后，大脑皮质收集入 HBSS-2 液中机械磨碎。皮质碎片移到有0.025%胰酶的HBSS-2液中37C消化15分钟。胰酶消化后，细胞用含有10%胎牛血清的HBSS-2液...
少突胶质细胞来源于1-2 天的大鼠。断头后大鼠大脑收集到Hams F-12培养液中，移除脑膜和血管。皮质用机械匀浆进行匀浆然后将细胞悬液依次通过230m和104m尼龙网进行过滤。细胞通过1000rpm 7分钟离心进行收集，用添加12.5%胎牛血清的DMEM进行重悬细胞。最后以2.0...