六．血清的灭活 细胞培养常用的是小牛血清，新买来的血清要在56℃ 水浴中灭火30分钟后，再经过抽滤方可加入培养基中使用。 七.HEPES溶液 HEPES的化学全称位羟乙基呱嗪乙硫磺酸（N-a-hydroxythylpiperazine-N- ethanesulfanic acid ）。对细胞无毒性作用。它是...

器材与试剂 干粉型培养基、胰蛋白酶，青霉素、链霉素. 纯净水系统、电子天平、PH计、磁力搅拌器。 具体步骤 一. 水的制备 细胞培养用水必须非常纯净，不含有离子和其他的杂质。需要用新鲜的双蒸水、三蒸水或纯净水 二.PBS的制备与消毒(也可用于其它BSS，如：H...

十六、各位老师，有几个关于多聚赖氨酸包被培养板的问题请教 1、pll到底溶于硼酸缓冲液还是溶于三蒸水或双蒸水 2、使用前是用灭菌的去离子水稀释吗，可不可以用双蒸水或别的 答：多聚赖氨酸溶于硼酸缓冲液或者无菌培养用水； 多聚赖氨酸包被培养板使用前是用...

因为自己做PC12细胞培养，想在接种前将培育皿用多聚赖氨酸包被，到论坛里搜索了下，关于多聚赖氨酸的帖子不少，看了一些帖子，将大部分收集在此。个人觉得关于多聚赖氨酸的配置、保存、使用各方面问题，这些帖子里面都解释了。 注：我只是摘了一个帖子里某段...

基本原理：本文分离单核细胞所用方法是Percoll非连续性密度梯度离心法，主要是根据不同细胞间密度的差别进行细胞分离。此法易操作，且使用通常的实验设备即可完成。 试剂与器材 外周血单个核细胞 PBS 1和PBS 10（无Ca2+、Mg2+），含0.5mM EDTA 胎牛血清（56℃...

4、从3中所获得的中性粒细胞进行纯化 1）因为方法3只能获得80－85%纯度的中性粒细胞，可以把方法2与方法3联合对中性粒细胞进行纯化。 2）收集从方法3 dextran沉降所得到的富含白细胞的血浆，275g*6min，离心。 3）管底沉淀用2ml PPP重悬 4）在一15ml离心管中...

血细胞由红细胞,白细胞,血小板等组成.实验中常用白细胞来做研究,如炎症渗出,细胞迁移,识别等都涉及到白细胞.白细胞又分为:粒细胞,淋巴细胞,单核细胞等.它们具有不同的功能.实验中常需要分离血细胞方能进行。 这里主要论述人外周白细胞的分离，主要是中性粒细...

大部分文献报导差速时间是2小时，但我个人做实验是遇到的情况说明2小时有些长了，已经有心肌细胞贴壁，而且把上层悬液吸出后转移，不知道为什么不好帖壁，成活率较低。我用的是0.125%胰酶分次消化。 我觉得影响心肌细胞贴壁的因素可以总结为如下几点： 1、所...

第一，盖玻片需要过酸，并且自来水、蒸馏水冲洗干净。两张或者以上的玻片很容易因为虹吸作用粘到一起，很容易冲不干净，很容易把两张完全重叠在一起的玻片当成一张，一定要看清楚，晾干片子最好是在消毒饭盒中进行，饭盒底面放上纱布，将玻片斜靠在饭盒侧壁，...

在细胞复苏过程中，有多次复苏失败，最终在查阅了相关技术积累了足够的复苏技能后复苏成功，现将细胞复苏的操作程序和注意事项总结如下，望能为同行提供些参考。 【材料】 1.常规细胞培养仪器设备、恒温水浴振荡器。 2.培养液（DMEM）胎牛血清（CBS）二甲基亚...