巨噬细胞培养 巨噬细胞属免疫细胞，有多种功能，是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞容易获得，便于培养，并可进行纯化。巨噬细胞属不繁殖细胞群，在条件适宜下可生活2－3周，多用做原代培养，难以长期生存。 巨噬细胞也建有无限细胞系...

1、选材很关键 选用胎儿椎间盘进行原代培养相对容易一些，可利用反复传代的方法来制作退变模型。直接选择人退变椎间盘进行培养时（一般选择手术摘除的椎间盘），患者的年龄及间盘的退变情况必须充分考虑在内。若年龄偏大，间盘退变很严重，培养的难度相应增大...

HepG2人肝肿瘤细胞株广泛应用于遗传毒理学及病毒培养等方面的研究,研究肝脏疾病发病机理及其临床应用有着重要意义。由于其与肝细胞具有相同的生物学活性，还被用于胰岛素抵抗的研究。本文对肝癌细胞培养的最佳条件做一简单综述。 1.HepG2细胞的复苏条件 1.1...

（2）离心：3000~4000/分离心10分钟，吸取上清液。 （3）滤过：再经直径0.22m滤孔的滤膜过滤，低温冻存贮备用；用时取1分适应培养基+2分培养基混合使用。 使用饲细胞(Feeder Cells)。制备： （1）取原代培养的人或动物胚胎成纤维细胞，90%汇合时制成细胞悬液...

1、二倍体细胞培养法 二倍体细胞培养法与一般培养相同，关键在于传代，其传代程序为： （1）吸除旧培养液注入另瓶中。 （2）用温BSS冲洗1次。 （3）用0.25%温胰蛋白酶消化，加入消化液量以仅覆盖细胞层即可；作用1~5分钟。 （4）待细胞附着松动、细胞质边缘...

14、DMSO之等级和无菌过滤之方式为何？ 冷冻保存使用之DMSO 等级， 必须为Tissue culture grade之DMSO (如Sigma D2650)， 其本身即为无菌状况， 第一次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中， 保存于4C， 避免反复冷冻解冻造成DMSO 之裂解而释出有害物质， 并可...

1、细胞冷冻管解冻培养时， 是否应马上去除DMSO？ 除少数特别注明对DMSO 敏感之细胞外， 绝大部分细胞株（包括悬浮性细胞）， 在解冻之后， 应直接放入含有10-15ml新鲜培养基之培养角瓶中， 待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可， 如此可避免大部分解冻后...

细胞受各种霉菌、细菌和支原体污染后，一般都较难排除或杀灭，其中以支原体更难排除，因此从预防着眼为上。 1、抗生素除菌法： 用BM－1（截耳素衍生物）和BM－2（四环素衍生物）抑制支原体 （1）抗生素制备：均可用PBS配成250浓缩液－20℃备用，使用浓度参考...

2、支原体污染的检测 （1）相差显微镜观察 直接取少许培养液滴在载物片上，再盖上盖片观察，支原体在镜下呈暗色微小颗粒，多位于细胞与细胞之间，有时可见类似于布朗运动的表现。应注意与细胞破碎溢出的内容物如线粒体等相区别。 （2）荧光染色法观察 用荧光...

概论 污染是细胞培养的大敌。预防和避免污染是细胞培养成功的关键之一。 一开始就要十分重视，防止污染，否则会前功尽弃，不仅浪费时间，而且浪费人力、物力，甚至造成无法弥补的损失。 （一）污染的类型 细胞培养过程中的污染不仅仅指微生物，而且还包括所有...