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  • 血管内皮细胞原代培养(人脐带静脉灌流消化法)2017-10-12 14:00:56

    内皮细胞易于从大血管分离培养成单层细胞,对于研究内皮细胞再生、肿瘤促血管生长因子(tumor angiogenesis factor,TAF)等有很大价值。 研究人内皮细胞培养以人脐带静脉灌流消化法最为简便,其法如下: 1、产后新鲜脐带,无菌剪取1015厘米长一段,如不能立即...

  • 细胞支原体污染(mycoplasma contamination)的PCR检测2017-10-12 14:00:25

    支原体菌株来源: M.Arginini ATCC23838 精氨酸支原体 M.FermentaneATCC19989 发酵支原体 M.SalivariumATCC23064唾液支原体 M.HominisATCC23114人型支原体 M.OraleATCC23714口腔支原体 M.HyorhinisATCC29052猪鼻支原体 其共同引物序列来自16s和23s保守区域,...

  • 细胞的原代培养和传代培养以及器材液体准备和无菌操作2017-10-12 13:59:48

    一、原代细胞培养 (一)原理:细胞培养(Cell culture)是模拟机体内生理条件,将细胞从机体中取出,在人工条件下使其生存、生长、繁殖和传代,进行细胞生命过程、细胞癌变、细胞工程等问题的研究。近年来,广泛地应用于分子生物学、遗传学、免疫学、肿瘤学、细...

  • 细胞系(Cell Line)或细胞株(cell strain)的建立2017-10-12 13:59:18

    一、概念 1、细胞系(Cell Line):原代培养舞经首次传代成功即成细胞系,由原先存在于原代培养物中的细胞世系(Lineage of Cells)所组成。 2、细胞株(Cell Strain):通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物称为细胞株。细...

  • PC12细胞培养方法步骤2017-10-12 13:58:49

    PC12细胞是大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞株,具神经内分泌细胞的一般特征,因其具可传代特点,广泛应用于神经生理和神经药理学研究。 1. PC12细胞有两种:未分化型和分化型。其中未分化型的PC12细胞贴壁能力强,传代时需要胰酶消化,形状不规则。分化型PC12细...

  • 脂肪源干细胞(Adipose-derived stem cells)的培养2017-10-12 13:58:16

    (1)吸脂术时用无菌针管从臀上方吸取深层脂肪组织20 mL。 (2) 在1 h内将其移至离心管内,加入等量PBS缓冲液,充分振荡后低速离心800 r/min10 min。 (3)反复冲洗3次后加入等量15 g/L I型胶原酶,37℃水浴中充分振荡30 min,再加入等量胎牛血清(FBS)中止...

  • 细胞培养基构成、配置、灭菌和储存(微孔滤膜过滤除菌)-22017-10-12 13:57:48

    8) 在细胞培养过程中,建议不加或加少量的抗生素,如血清的浓度较低则所加抗生素的量也要相应降低一些。 (9) 建议用1N HCl或1N NaOH来调节培养基的pH,因为用碳酸氢钠调pH值对培养液的渗透压影响比较大。如下图所示: 图2 MEM SLM(SLM120)在相同pH值时所加...

  • 细胞培养基构成、配置、灭菌和储存(微孔滤膜过滤除菌)-12017-10-12 13:57:18

    细胞培养基的种类繁多,细胞培养方式也较多,如何正确地使用培养基及最大程度地保持培养基的营养以维持细胞的生长,对每个细胞培养工作者都很重要。培养基的使用依据不同的培养基种类、培养方式、细胞种类的不同而存在差异。 1、细胞培养液的构成 细胞培养液...

  • 支原体污染的特点及检验的相关知识2017-10-12 13:56:44

    支原体是一种大小介于细菌和病毒之间(最小直径0.2um)并独立生活的微生物。约有1%可通过滤菌器。支原体无细胞壁形态呈高度多形性。可为圆形、丝状或梨形。 支原体形态多变,在光境下不易看清内部结构。电镜下观察支原体膜为三层结构。其中央有电干密度大的密...

  • 细胞培养(cell culture)中污染的清除与预防措施2017-10-12 13:56:14

    一、污染的清除 培养细胞一经污染,多数较难处理。如果污染细胞价值不大,宜弃之;有细胞株留存的或可购置的,可在寻找原因后彻底消毒操作室,复苏或重新购置细胞,再培养。若污染细胞价值较大,又难于重新得到,可采取以下办法清除。 1、使用抗生素 抗生素对...

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