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  • 补体结合反应(2)2017-10-12 14:26:23

    由于在实际应用时补体有一部分损失,故需酌量增加一些,通常取其次高的一管补体量称为1个使用单位。在下例中: 1 个确定单位 =0.1ml 1:30 稀释的补体。 1 个使用单位 =0.12ml1:30 稀释的补体。 4 )补体的稀释 若使每 0.2ml 补体含 2 个使用单位,可照下式计...

  • 补体结合反应(1)2017-10-12 14:25:54

    原理 ] 抗原与抗体结合形成的复合物能激活补体,若抗原是绵羊红细胞,那么补体被激活后,使绵羊红细胞溶解,出现溶血现象。补体结合实验是一种有补体参与,并以绵羊红细胞和溶血素作为指示系统的抗原抗体反应。参与本反应的五种成分可分为两个系统,一为待检...

  • 免疫复合物型超敏反应(Immune Complex hypersensitivity)-Arth2017-10-12 14:25:25

    一、实验原理: Arthus reaction 是指给机体反复多次注射抗原,使个体内存在高水平抗体时,然后在局部皮下组织注射相同性质的抗原。则在局部组织形成大复合物,导致激活补体,释放过敏毒素,组织胺及凝聚血小板,释放血管活性物质,最终导致局部出现水肿、出...

  • 补体介导的细胞毒试验(Complement Mediated Cytotoxicity Test2017-10-12 14:24:57

    一、实验原理 带有特异抗原的靶细胞(如正常细胞、肿瘤细胞、病毒感染细胞)与相应抗体结合后,在补体的参与下,引起靶细胞膜损伤,导致细胞膜的通透性增加、细胞死亡。染料(例如:伊红-Y、台盼蓝)可通过细胞膜进入细胞内使细胞着色,故可用于指示死细胞或...

  • 免疫沉淀(IP)常见问题分析与解决办法2017-10-12 14:24:22

    问题 可能原因 解决办法 高背景 吸取了不溶于去污剂中的蛋白(沉淀) 离心后立刻吸取上清,如果发生了重悬,则需要再次离心 洗涤不完全 在洗涤过程中将 试管盖好盖子,倒转混匀几次保证洗涤充分后再离心 非特异蛋白结合到珠子上了 珠子没有被充分封闭。确定...

  • ChIP常见问题分析与解决办法2017-10-12 14:23:51

    本文列出了ChIP实验中常见的问题以及解决办法,供您实验参考! 问题 可能原因 解决办法 非特异性 抗体对照背景高 非特异性结合 Protein A 或G beads 将标本和beads混合孵育1hr后去除,然后再加入 抗体进行反应(包括预纯化标本步骤) ChIP 缓冲液污染了 重新...

  • 染色质免疫沉淀(ChIP)技术的难点及应用2017-10-12 14:23:20

    序言 随着人类基因组测序工作的基本完成,功能基因组学的研究逐渐成为研究的热点。而基因表达的调控又是功能基因组学的一个重要研究领域。研究某个蛋白因子的调控功能,可以通过对蛋白活性(激活或抑制其活性),蛋白数量(过表达Overexpression或基因缺陷型K...

  • 免疫沉淀(Immunoprecipitation)实验原理、仪器试剂和操作步骤2017-10-12 14:22:49

    (一)原理 免疫沉淀是利用抗原抗体特异性反应纯化富集目的蛋白的一种方法。抗体与细胞裂解液或表达上清中相应的蛋白结合后,再与蛋白 A/G(Protein A/G)或二抗偶联的agaose或Sepharose珠子孵育,通过离心得到珠子-蛋白A/G或二抗-抗体-目的蛋白复合物...

  • 单向定量免疫电泳(火箭免疫电泳,rocket immunoelectrophoresis2017-10-12 14:22:17

    实验原理 单向定量免疫电泳又称火箭电泳(rocket immunoelectrophoresis)。在琼脂内掺入适量的抗体,在电场作用下,定量的抗原泳动遇到琼脂内的抗体,形成抗原抗体复合物沉淀下来。走在后面的抗原继续在电场作用下向正极泳动,遇到琼脂内沉淀的抗原抗体复合...

  • 放射免疫对流电泳(counter-current electrophoresis)技术2017-10-12 14:21:46

    一)原理 将放射性元素标记的抗体(或抗原)与相应的抗原(或抗体)沉淀时,沉淀线通过自显影而证实。所谓自显影,就是通过复合物中的标记同位素在蜕变过程中 放出的射线,作用于感光材料的卤化银晶体而产生潜影,再经过显影把像显示出来。这样,能检出肉眼看...

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