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  • 免疫沉淀(Immunoprecipitation)实验材料和方法2017-10-12 14:16:16

    免疫沉淀是利用特异性抗体识别并分离抗原的方法。 材料: 上样buffer的配方(用前现配): 2ul 1.25M Tris-HCL , pH 6.8 35ul distilled water 2.5ul 2-mercaptoethanol 12.5ul 10%SDS 10ul 80% glycerol 2ul bromphenol blue TNE buffer: 10mM Tris-HCl pH 8.0...

  • 沉淀反应实验原理、材料和实验方法(3)2017-10-12 14:15:44

    五 对流免疫电泳 【 实验原理 】 当抗原和抗体在琼脂介质中电泳时 ,抗体的 PI 比较高,在适当的 pH 值下,抗体带正电荷而抗原带负电荷,故在电场中抗体向阴极方向移动而抗原向阳极运动,直至相遇后形成沉淀线,其原理与双向免疫扩散相同,但具有方法简便,快...

  • 沉淀反应实验原理、材料和实验方法(2)2017-10-12 14:15:15

    三 双向扩散 【 实验原理 】 双向免疫扩散是指抗原和抗体在同一凝胶内部扩散,彼此相遇后形成特 异性的沉淀线。该反应是将抗原和抗体加入同一凝胶中两个相隔一定间距的小孔内,使两者进行相互扩散。当抗原和抗体浓度之比相适宜时,彼此相遇形成一白色弧型沉淀...

  • 沉淀反应实验原理、材料和实验方法(1)2017-10-12 14:14:46

    可溶性抗原(如血清中的蛋白,组织浸出液,细胞裂解液等)与其相应的抗体在溶液中或凝胶中结合,若比例合适,可形成肉眼可见的抗原-抗体复合物,这就是免疫沉淀反应。免疫沉淀反应可以在小玻璃管中或毛细玻璃管及凝胶平板中进行。在用凝胶平板做实验时,常用琼脂糖...

  • 沉淀反应技术(Precipitation reaction technique)(2)2017-10-12 14:14:10

    2.取试管5支(5mm50mm)置于试管架上,编号。第1、2试管内加炭疽沉淀血清,第3、4试管内加正常血清,第5管内加待检抗原,分别用毛细滴管加至4mm~5mm。 3.第1、4、5试管轻轻叠加等量缓冲液,第2、3试管轻轻叠加等量待检抗原。为防止上下两界面破坏,可将小...

  • 沉淀反应技术(Precipitation reaction technique)(1)2017-10-12 14:13:42

    一、 概述 可溶性抗原(如细菌浸出液、含菌病料浸出液、血清以及其他来源的蛋白质、多糖质、类脂体等)与其相应的抗体相遇后,在电解质参与下,抗原抗体结合形成白色絮状沉淀,出现白色沉淀线,此种现象称为沉淀反应。沉淀反应中的抗原叫沉淀原(precipitinog...

  • 单向、双向免疫琼脂扩散和免疫电泳(Single Immunodiffusion and2017-10-12 14:13:11

    可溶性抗原与相应抗体以合适的比例发生特异反应时,在一定温度和电解质存在的条件下,形成肉眼可见的沉淀物,称为沉淀反应。沉淀反应的抗原可以是多糖、蛋白质、脂类等。 根据抗原与抗体的不同条件及其它因素,沉淀反应可以分为以下三种主要形式。即:环状沉...

  • 免疫酶标方法(直接法、间接法、PAP法和双PAP法)2017-10-12 14:12:40

    一、直接法 1.标本固定。 2.PBS洗涤23分钟。 3.1% H2O2(或1% H2O2 甲醇)抑制内源性过氧化物,室温10~20分钟。 4.正常血清(1:10)孵育,室温20分钟。 5.滴加酶标记的抗体37℃1小时或4℃过夜。 6.PBS洗涤33分钟。 7.DAB+H2O2显色5~10分钟,镜下控...

  • 对流免疫电泳技术(CIET)2017-10-12 14:12:09

    一、原理 在pH8.6的琼脂凝胶中,抗体球蛋白只带有微弱的负电荷,在电泳时,由于电渗作用的影响,抗体球蛋白不但不能抵抗电渗作用向正极移动,反而向负极倒退。而一般抗原蛋白质带负电荷,将抗原置于负极,将血清抗体置于正极,电泳后则在两孔之间相遇,并在比...

  • 冷凝集(cold agglutination)实验知识及操作步骤2017-10-12 14:11:40

    一、概念与临床意义 冷凝集实验主要用于由肺炎支原体引起的原发性非典型性肺炎的辅助诊断。参考值:凝集价1:32;临床意义:由肺炎支原体感染引起的原发性非典型性肺炎患者的血清中常含有较高的寒冷红细胞凝集素,简称冷凝集素,它能与患者自身红细胞或O型人...

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