聚乙二醇沉淀法测定免疫复合物 简要原理 聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)是一种无电荷的线性分子结构的多糖,为乙二醇的聚合物,有较强的脱水作用。其沉淀循环免疫复合物(circulating immune complex,CIC)的原理不太清楚,可能与CIC的分子量增大和构...
金黄色葡萄球菌A蛋白(staphylococcal protein A,SPA)可与IC中IgG的Fc段结合。将待测血清用低浓度PEG沉淀后加至SPA包被的固相载体上,再以酶标记的SPA与之反应,即可检测样本中有无IC。 1、试剂 (1)5%与2.5%PEG用0.02mol/LpH7.4PBS配制; (2)牛血清白蛋...
根据世界卫生组织(WHO)和国际免疫学会报告,30多种补体成分中通常只需检测C3、C4、Clq、B因子和C1酯酶抑制物等5种成分。 测定方法大致可分为免疫溶血法和免疫化学法。免疫溶血法主要根据抗原与其特异性抗体(IgM、IgC型)结合可激活补体经典途径,导致细胞...
1、原理 血样本中C3与抗C3血清在液相中反应,比例合适时形成可溶性免疫复合物。聚乙二醇(PEG6 000)可沉淀其免疫复合物,使溶液的透光率(T)下降。免疫复合物的量与C3和抗C3量呈函数关系,当固定抗C3浓度时,免疫复合物的形成量主要取决于样本中C3的含量,...
原理 兔红细胞不经致敏可激活人补体旁路途径,导致兔红细胞溶解。在反应系统中加入乙二醇双氨基四乙酸(ethyleneglycol-bis- aminotetracetate,EGTA)可和血浆Ca2+螯合,EGTA与Mg2+结合能力很弱,故经典途径被封闭。根据兔红细胞的溶血程度,可测定补体旁路...
凡最高稀释度的溶血素可呈现完全溶血者为一个单位。依上表结果第10管(即1:4000倍稀释)0.5毫升溶血素为一个单位,在溶血反应中常用 0.5毫升中含有2个溶血素单位的溶液,所以试验时应取1:2000倍稀释的溶液。 (2)补体单位滴定 依下表加入各试剂: 管号 1...
一、溶血反应 免疫血清与其相应的抗原细胞(血球、细菌及其组织细胞)相遇,并在补体的参与下可出现溶细胞反应。依抗原、抗体的种类不同可有溶血反应、溶菌反应等。 溶菌反应只在某些细菌中出现(如霍乱弧菌)。应用溶血反应是补体结合反应中不可少的因素。...
免疫复合物(immunecomplex,IC)或抗原抗体复合物是抗原与其对应抗体相结合的产物。在正常情况下,机体内的游离抗原与相应抗体结合形成IC,可被机体的防御系统清除,作为清除异物抗原的一种方式,对机体有利。但在某些情况下,体内形成的IC不能被及时清除,...
电泳是通过电场作用将C4迁移率不同的同种异型分离开,然后依照分型标准定型。在某些情况下,C4A某种同种异型与C4B某种同种异型迁移率相同不易区分开,此时可用溶血覆盖技术加以区别。 1、原理 用肼处理豚鼠血清,可灭活其补体成分C4,使之成为帜缺乏的血清。...
一、补体测定 1、血清总补体活性测定 当兔抗羊红细胞血清与羊红细胞结合后,遇到补体即可使羊红细胞发生溶血,依据这一特点可建立测定血清中总补体活性的方法。 当血清的效价和绵羊红细胞浓度保持一定的情况下,在规定的反应温度和时间内,溶血程度与补体量呈...