一、概述 冷冻切片是利用物理降温的方法将新鲜的组织标本冷冻使其产生一定的硬度进行切片的技术方法。与石蜡切片相比,由于冷冻切片不需脱水包埋因此制片速度 快,是为手术进行中的临床医师提供病理诊断的良好方法。此外由于冷冻切片的标本是未经固定的新鲜...
1.第一步准备工作:配制六胺银染液,将10%硝酸银2.5ml倒入干净的染色缸内,加入2%硼砂5ml,液体呈乳白色,再加入3%乌洛托品40ml,染液逐渐呈透明状。 2.第二步染色过程:事先把温箱调至60℃备用,切片经脱蜡至水,用1%过碘酸氧化10 min,水洗,然后切...
1.试剂准备:苏木精10 g,硫酸铝钾80 g,无水乙醇200 ml,蒸馏水2000 rnl,氧化汞3 g,冰乙酸40ml。 2.配制步骤 (1)将2000 ml蒸馏水注入一只3000 的大号三角烧瓶内,加入80 g硫酸铝钾后置电炉或电磁炉上加热硫酸铝钾完全溶解。 (2)将200 ml无水乙醇注入一只...
实验九 动物骨髓细胞有丝分裂染色体制片 一、实验目的: 了解动物细胞染色体制片的原理,学习骨髓细胞染色体的制片方法,观察动物细胞染色体的数目和形态。 二、实验原理: 染色体是基因的载体。真核细胞染色体的数目和结构是重要的遗传指标之一。制备染色体...
2、将长、短玻璃板分别插到 形硅橡框的凹形槽中。注意勿用手接触灌胶面的玻璃。 3、将已插好玻璃板的凝胶模平放在上贮槽上,短玻璃板应面对上贮槽。 4、将下贮槽的销孔对准已装好螺丝销钉的上贮槽,双手以对角线的方式旋紧螺丝帽。 5、竖直电泳槽,在长玻璃板...
⑤1%TEMED:取TEMED1ml,加重蒸水至100ml,置棕色瓶内4℃贮存。 ⑥10%过硫酸铵(AP):称AP1g,加重蒸水至 100ml,此液应每周新配,置棕色瓶内,4℃贮存。 ⑦电极缓冲液(0.1%SDS,0.1molL-1 pH7.2磷酸盐缓冲液):称SDS1g,加500ml0.2molL-1 pH7.2磷酸盐缓冲...
三、器材与试剂: 1.器材: ①夹心式垂直板电泳槽,凝胶模(1351001.5mm)(北京六一仪器厂) ②直流稳压电源(电压300600V,电流50100mA) ③吸量管(1,5,10 ml) ④烧杯(25,50,100 ml) ⑤ 细长头的滴管 ⑥1ml注射器及6号长针头 ⑦微量注射器(10l或 50l...
目的: 1.学习SDSPAGE测定蛋白质分子量的基本原理。 2.掌握垂直板型电泳的基本操作技术。 二、原理: 蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中电泳时,它的迁移率取决于它所带净电荷以及分子的大小和形状等因素。 1967年,Shapiro等人发现,如果在聚丙烯酰胺凝胶系统中加...
指示染料是做为电泳时迁移的可见标志。对于碱性缓冲系统,一般用溴酚蓝或酚红(通常每管加0.005毫升0.1%的染料溶液)。对于酸性缓冲液系统,一般用甲基绿或次甲基蓝。指示染料可直接加在玻璃中或上电极槽的缓冲液中,也可与样品液混合。 本实验样品液准备:取...
上述各贮备液都需冷藏(4℃)。尤其是C、D两贮液,由于Acr及Bis易水解生成丙烯酸和NH3,冷藏也只能保存12月。如 PH超过5.2,即失效。 2.凝胶的制备: (1)将内径0.5cm的玻管切成710cm长,切口磨光,洗液浸泡后,水洗净烘干。 (2)分离胶的制备及预电泳:于...