（二）聚丙烯酰胺凝胶的性能及制备原理 1．性能 聚丙烯酰胺凝胶的机械强度好，有弹性，透明，相对地化学稳定，对pH和温度变化较稳定，在很多溶剂中不溶，是非离子型的，没有吸附和电渗作用。原料成分要采用高纯度制品，通过改变浓度和交联度，可以控制孔径变...

一、目的： 1．学习聚丙烯酰胺凝胶电泳原理。 2．掌握聚丙烯酰胺园盘电泳的操作技术。 3．比较醋酸纤维薄膜电泳与本法分离血清蛋白质的效果。 二、原理： （一）盘状电泳原理 盘状电泳是在区带电泳原理的基础上，以孔径大小不同的聚丙烯酰胺凝胶作为支持物，...

一、原理 细菌体中含有大量蛋白质，具有不同的电荷和分子量。强阴离子去污剂SDS与某一还原剂并用，通过加热使蛋白质解离，大量的SDS结合蛋白质，使其带相同密度的负电荷，在聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）上，不同蛋白质的迁移率仅取决于分子量。采用考马斯亮兰...

一、材料与仪器 30%丙烯酰胺溶液；1.5mol/L Tris-HCl分离胶缓冲液，PH8.8；1.0mol/L Tris-HCl浓缩胶缓冲液，PH6.8；电泳缓冲液，PH8.3；10%SDS溶液；10%过硫酸铵溶液；样品处理液；染色液；脱色液；电泳玻璃板，电泳电源架，电泳槽，电泳仪等；蛋白Mark。 二...

[实验步骤] 一般先制分离胶，再在分离胶上面制作浓缩胶。将贮液提前由冰箱中取出，达到室温后，按上表的比例配制工作溶液。 1、分离胶的制备 先在一只烧杯按比例加入分离胶原液1号、2号贮液和蒸馏水，在另一只烧杯中加入3号贮液，将上述两烧杯均置于真空干燥...

目的与原理] 掌握一种聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质的方法，并用此法进一步分析血清蛋白的组成。 1、聚丙烯酰胺凝胶 聚丙烯酰胺是由丙烯酰胺（Acr）、NN甲叉双丙烯酰胺（Bis），在催化剂过硫酸铵（ammonium persulfate (NH4)2S2O8 简称AP）或核黄素（ribofavi...

4．加样 作为分析用的PAGE加样量仅需几微克，2-3ul血清电泳后就能分出几十条蛋白区带。为防止样品扩散，应在样品中加入等体积40%蔗糖（内含少许溴酚兰）。用微量注射器取5ul上述混合液，通过缓冲液，小心地将样品加到凝胶凹形样品槽底部，待所有凹形样品槽内...

④ 浓缩胶缓冲液：称取1mol/L HCl 48ml，Tris5.98g，TEMED 0.46ml，加重蒸水至80ml,调pH6.7，用重蒸水定容至100ml，置棕色瓶内，4℃贮存。 ⑤ 浓缩胶贮液：称Acr10g，Bis2.5g 加重蒸水溶解后定容至100ml，过滤后置棕色瓶内，4℃贮存。 ⑥ 40%蔗糖溶液（W/V）...

一）原 理 由于聚丙烯酰胺凝胶的浓度可以按要求配制，因此可以形成连续系统和不连续系统两种电泳系统。不连续系统最大的特点在于大大提高了样品分离的分辨率。这种电泳的主要特点是：（1）使用两种不同浓度的凝胶系统；（2）配制两种凝胶的缓冲溶液成分及pH不...

（3）电荷效应 在分离胶中，各种血清蛋白所带静电荷不同，而有不同的迁移率。表面电荷多，则迁移快，反之则慢。 因此各种蛋白质按照电荷多少、分子量大小及分子形状以一定顺序排成一个个区带。不连续PAGE所具有的分子筛效应、浓缩效应和电荷效应大大提高了它...