【目的和要求】 1. 掌握聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理 2. 掌握垂直板状凝胶电泳槽的使用和凝胶的配制方法。 3. 学会利用相对迁移率分析蛋白质种类。 【实验原理】 带电颗粒在电场的作用下，向着与其相反的电极移动，称为电泳。 电泳做为一种物质分离及鉴定技...

一、目的 同工酶是指能催化同一种化学反应，但其酶蛋白本身的分子结构组成却有所不同的一组酶。研究表明，植物在发育过程中，所含同工酶的种类和比例都不相同，它们与植物的遗传、生长发育、代谢调节及抗性等都有一定关系，因此作为基因表达的产物，测定同工...

二维聚丙烯酰胺凝胶电泳技术结合了等电聚焦技术（根据蛋白质等电点进行分离）以及SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳技术（根据蛋白质的大小进行分离）。这两项技术结合形成的二维电泳是分离分析蛋白质最有效的一种电泳手段。 通常第一维电泳是等电聚焦，在细管中（1～3...

Tricine-SDS-PAGE是用于分离分子量在1-10kD的肽类用的。 一、 试剂配制： 1． Low Bis acrylamide（49.5% T, 3% C） Acylamide 48.0g Bis 1.5g Water make up to 100ml 2. High Bis acrylamide (49.5% T, 6% C) Acrylamide 46.5g Bis 3.0g Water make up to10...

四、实验步骤： ① 安装制胶模具（教师演示，学生安装） 注意事项：a、在整个过程中要轻拿轻放，以免将玻璃板弄碎。 ②制作分离胶(浓度10%) 分离胶配方(浓度10%):pH8.9 Tris-HCl溶液:0.8ml 分离胶PAG溶液:1.2ml 蒸馏水:1.6ml 10%TEMED:40l %AP: 40l 将上述溶...

3、不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理 系统的不连续性表现在以下几个方面： （1）凝胶板由上、下两层胶组成，两层凝胶的孔径不同。上层为大孔径的浓缩胶，下层为小孔径的分离胶。 浓缩胶：又称堆积胶。凝胶浓度较小，孔径相对较大。把较稀的样品加在浓缩胶上，...

一、目的 1、了解聚丙烯酰胺凝胶电泳原理 2、了解聚丙烯酰胺凝胶的制作过程 3、了解过氧化物酶同工酶电泳过程 二、实验原理： 1、电泳原理及影响电泳的主要因素 带电离子在电场中的泳动速度（1）和迁移率（泳动度）（2） V= Eqa (1) 6r u= qa (2) 6r 由（2）...

Q：配胶缓冲液系统对电泳的影响？ A：在SDS－PAGE不连续电泳中，制胶缓冲液使用的是Tris－HCL缓冲系统，浓缩胶是pH6.7，分离胶 pH8.9；而电泳缓冲液使用的Tris－甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中，其pH环境呈弱酸性，因此甘氨酸解离很少，其在电场的作用下，泳动效...

一、目的要求 1.学习电泳原理和技术 2.学习和掌握SDS－聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分离蛋白质技术 二、原理 聚丙烯酰胺凝胶是由单体丙烯酰胺(acrylamide，简称Acr)和交联剂 N,N-甲叉双丙烯酰胺(N，Nmethylene-bisacylamide，简称Bis)在加速剂N，N，N，N四甲基乙...

一、蛋白质SDS-PAGE电泳 1、安装垂直板电泳装置 用洗洁精、清水和无水乙醇清洗两块玻璃板，晾干后安装。 2、制备SDS-聚丙烯酰胺凝胶 （1）配制9%分离胶（15ml）：双蒸水 6.55ml，1.5M Tris-HCl（pH8.8）3.75ml，30%丙烯酰胺储存液（Acry/Bis）4.5ml，10%SDS 1...