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  • 免疫荧光(Immunofluorescence, IF)实验方法2017-10-12 20:41:32

    免疫荧光技术是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。它是根据抗原抗体反应的原理,先将已知的抗原或抗体标记上荧光基团,再用这种荧光抗体(或抗原)作为探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体)。利用荧光显微镜可以看见荧光所在的...

  • 常用免疫组织化学染色方法 22017-10-12 20:40:49

    五)免疫组化双染色法。(ⅰ) (Ionmuno- Histochemistry double staimimg method) 1.切片脱蜡至水。 2.0.3%H2O2甲醇处理切片10分钟。 3.水洗。 4.抗原修复。 5.PBS洗3次,每次1分钟。 6.加入非免疫性动物血清,孵育 10分钟。 7.PBS洗3次,每次2分钟。 8.加入第...

  • 常用免疫组织化学染色方法 12017-10-12 20:40:03

    一)、ABC法: (注,下面各种方法,均为手工操作,如没特别说明,均在室温下进行) 1.切片经二甲苯Ⅰ 5分钟。 2.切片经二甲苯Ⅱ 5分钟。 3. 无水酒精Ⅰ 30秒。 4. 无水酒精Ⅱ 30秒。 5. 95% 酒精Ⅰ 30秒。 6. 95%酒精Ⅱ 30秒。 7. 90%酒精 30秒。 8.80%酒精 30...

  • B 淋巴细胞膜表面免疫球蛋白(SmIg)的检查——直接免疫荧光法2017-10-12 20:39:19

    一、实验原理 SmIg 是B 细胞的抗原识别受体,也是B 细胞特异的表面标志,用直接免疫荧光法可检查出SmIg。用荧光素标记的抗Ig 抗体,在一定条件下与淋巴细胞混合,荧光素标记的抗Ig 抗体可以与B 细胞表面的Ig 结合,在荧光显微镜下观察可见B 细胞膜上出现荧光...

  • 溶血空斑试验——小室液相法(Test of Plague Forming Cell)2017-10-12 20:38:33

    一、基本原理 溶血空斑试验,又称空斑形成细胞(Plague Forming Cell, PFC)试验,是一种体外检测抗体形成细胞的方法。将一定量洗涤过的绵羊红细胞注射入小鼠腹腔,四天后将小鼠杀死,取脾脏制成脾细胞悬液,内含抗体形成细胞。然后将脾细胞、绵羊红细胞,补...

  • 免疫检测的基础知识2017-10-12 20:37:49

    ELISA是一种免疫测定。免疫测定(immunoassay,IA)是应用免疫学技术测定标本的方法。在临床检验中主要通过抗原抗体反应检测体液中的抗体或抗原性物质。 1.1 抗原 抗原是能在机体中引起特异性免疫应答的物质。抗原进入机体后,可刺激机体产生抗体和引起细胞免...

  • 细胞增殖检测:BrdU2017-10-12 20:37:05

    5-brdu 的分子量为307.1,将100mg分为三份30.7mg(0.1mmol),溶于1ml三蒸水,分装-20度保存。用的时候再稀释100倍,如在1ml 溶液里加入10ul即可。尽量分装为小剂量,如100ul,避免反复冻融使其活性降低。 1、BudR贮存液的配制 BudR 5mg(先用0.5ml 1N NaOH溶...

  • 细胞增殖检测:CFSE原理和CFSE配制2017-10-12 20:36:23

    一、原理 荧光染料CFSE, 也可称为CFDA SE(5,6- carboxyfluorescein diacetate,succinimidyl ester) 即羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂,是一种可穿透细胞膜的荧光染料,具有与细胞特异性结合的琥珀酰亚胺脂基团和具有非酶促水解作用的羟基荧光素二醋酸盐...

  • 细胞增殖检测:H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)渗入法材料和操作方法2017-10-12 20:35:35

    一、材料及试剂 1、培养基:RPMI-1640或TC199培养液 2、PHA;同形态学方法 3、小牛血清 4、3H-TdR;选用比活性为2Mci~10Mci/mg分子的制品,将1Mci/ml溶液以生理盐水稀释成100uci/ml,于4℃保存备用。临用时再用培养液稀释成10uci/ml溶液。 5、3%冰醋酸 6、浓...

  • 细胞增殖检测方法概论2017-10-12 20:34:51

    一、胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)渗入法 胸腺嘧啶核苷(TdR)是DNA特有的碱基,也是DNA合成的必需物质。用同位素3H标记TdR即3H-TdR作为DNA合成的前体能掺入DAN合成代谢过程,通过测定细胞的放射性强度,可以反映细胞DAN的代谢及细胞增殖情况。但是具有放射性。 二...

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