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  • 角蛋白(Keratin)2017-10-12 20:17:55

    角蛋白分为表皮角蛋白和细胞角蛋白两种,这是根据其分部的部位而分的。表皮角蛋白包括皮肤表皮,消化道粘膜上皮、腺上皮甲状腺滤泡上皮、气管、支气管上 皮、肺泡上皮,角膜上皮、前列腺上皮等。细胞角蛋白包括颌下腺,胰腺,胸腺,细胞,肝细胞,肾小管细胞...

  • 单克隆小鼠抗人上皮细胞膜抗原2017-10-12 20:17:12

    上皮细胞膜抗原是上皮细胞表面大分子糖蛋白物质,它不仅存在于各种上皮,以及各种上皮来源的肿瘤,也可存在于部分非上皮及其来源的肿瘤,如浆细胞,组织细胞等。 应用EMA来检测正常的组织时,其阳性表达主要在细胞膜上,但在检测肿瘤时,这种阳性物不仅在细胞...

  • 癌胚抗原(Carcinombryonic antigen ,CEA)2017-10-12 20:16:32

    自1965年Gotel等从结肠癌分离出一种肿瘤的相关抗原后,经过进一步的研究后发现,它存在于胎儿的肠里,由于人们将其称为癌胚抗原。在实际应用 中,CEA是一种广谱的标记物。经实验证明,它对胃癌,肠癌,肺癌,乳腺癌,胰腺癌,子宫颈癌,子宫体腺癌,卵巢癌,...

  • 山羊抗人甲胎蛋白(Goat anti human alphafeloprotein,AFP)2017-10-12 20:15:52

    AFP主要由胎儿肝细胞和卵黄细胞产生的一种酸性糖蛋白少量由胎儿的胸腺、肺、胃、肠道的细胞产生。AFP也不是一种肝癌特有的标记物。初用时把AFP作 为原发性肝癌的一项特异性诊断指标。随着免疫组化的深入开展和研究的深入进行,实验结果证明:AFP的升高不仅在...

  • 抗体结构(antibody structure)2017-10-12 20:15:09

    抗体(antibody,Ab)是机体免疫细胞被抗原激活后,由分化成熟的终末B细胞--浆细胞合成、分泌的一类能与相应抗原特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 抗体是具有4条多肽链的对称结构,其中2条较长、相对分子量较大的相同的重链(H链),含450?550个氨基酸残基...

  • 筛选解离速率优化的单链抗体(scFv)2017-10-12 20:14:27

    选择3~5轮后,随机挑取克隆加入96孔微量滴定板中 并诱导表达可溶性scFv.然后,在包被有相关抗原的96孔微量滴定板中,用ELISA分析含有可溶性scFv的细菌上清。此过程可以识别出那些结合了抗原的scFv.但即便采用上述严谨性选择后,ELISA阳性克隆中仅有部分克隆的...

  • 冷酒精沉淀法抗体纯化2017-10-12 20:13:45

    1、 血清加3倍体积的蒸馏水,调节 pH至7.7()冷却到0℃。在激烈搅拌的条件下,加预冷的酒精(-20℃)到最终浓度为20%,保持在-5℃。产生的沉淀(a),含有大多数种类的免疫球蛋白。 2、 沉淀a悬浮于25倍体积的0.15~20mol/l NaCl溶液(冷)中,加有0.05mol/l醋...

  • 抗体的纯化:盐析法(salting out method)2017-10-12 20:13:01

    精制抗体的方法很多。一般采用综合技术,避免蛋白变性。如分离IgG时,多结合使用盐析法与离子交换法,以求纯化。提取IgM的方法也很多,如应用凝胶过滤与制备电泳法,或离子交换与凝胶过滤等。 一、原理 蛋白质在水溶液中的溶解度是由蛋白质周围亲水基团与水形...

  • 抗体纯化:deae-sephadex a-50 柱层析法(column chromatography)2017-10-12 20:12:14

    一、原理 deae-sephadex a-50(二乙氨基乙基-葡萄糖凝胶a-50)为弱碱性阳离子交换剂。用NaOH将Cl-型转变为OH-型后,可吸附酸性蛋白。血清中的球蛋白属于中性蛋白(等电点为pH6.85~7.5),其余均属酸性蛋白。pH7.2~7.4的环境中,酸性蛋白均被deae- sephadex...

  • 抗体纯化:SPA-sepharose cl-4b亲合层析法(affinity chromatogra2017-10-12 20:11:28

    一、原理 葡萄球菌a蛋白(SPA)具有与多种哺乳动物IgG分子fc段结合的能力,并与不同IgG亚类的结合力有所差别。改变pH及离子强度可洗脱结合于 SPA-sepHarose cl-4b 柱上的IgG或不同的IgG亚类,可直接纯化血清或小鼠腹水中的IgG抗体。 二、试剂器材 1、spa-seph...

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