胶体金可用多种方法制备,其中应用较为广泛的是化学还原法。这一方法的基本原理是在氯化金水溶液中加入一定量的还原剂,使金离子还原为金原子,可用于制备胶体金的还原剂有50余种,但在生物医学领域内最为常用的还原剂是白磷、柠檬酸三钠以及鞣酸等。 白磷还...
免疫胶体金银染色和其它免疫细胞化学方法一样,要想得到好的染色效果,关键取决于标本处理是否适当,只有使抗原性及组织结构保存的好,才能使后续的染色成功成为可能,其次要用高特异性和高效价的一抗,选择合适的稀释度。由于免疫组化方法广泛应用于不同的生...
1、基本原理 彩色免疫金银法(coloured IGSS, CIGSS)是在IGSS基础上发展起来的一种新方法。其基本原理与彩色显影相似。IGSS染色方法在抗原位点处生成银颗粒经铁氰化钾与溴化钾的作用即被氧化成溴化银,后者与彩色显影剂相接触立即被还原成金属银,而彩色显...
2.LR White 和Lr gold 是一种混合的丙烯酸单体的透明树脂,具有极低的粘度(8cps)和较强的嗜水性,因此有较强的穿透性,有利于抗体(或抗原)和免疫化学物质穿过LR树脂,达到组织结合部位。在免疫细胞化学的光镜(半薄切片)和电镜水平应用都具有良好效果。...
(1)包埋剂的配制:商品提供的Lowicrys包埋剂由三个部分组成:单体(Monomer),交联剂(Crosslinker)和引发剂(Initator)。调整单体和交联剂的比例,增加交联剂的量,组织块的硬度增加。中等硬度的组织块,其配制比例如下: K4M:单体 17.30g 交联剂 2.70...
免疫细胞化学技术为在细胞水平上研究免疫反应做出了贡献,但由于光学分辨率的限制,不可能从细胞超微结构水平观察和研究免疫反应。因此,Singer于1959年首先提出用电子密度较高的物质铁蛋白(ferritin)标记抗体的方法,为在细胞超微结构水平研究抗原抗体反应...
免疫电镜技术与光镜免疫细胞化学染色方法的基本原理和试剂准备基本相同,相关内容可参考本书第四章,这里仅介绍免疫电镜的几种染色方法,包括包埋前染色、包埋后染色和冰冻超薄切片免疫染色三种。 1.包埋前染色 包埋前染色即在进行常规电镜包埋处理前先行免...
(一) 原理 免疫铁蛋白技术是以铁蛋白标记抗体,再以铁蛋白抗体与待检抗原作用。通过电镜检查,观察到铁蛋白抗体所在的位置,即抗原所在。 (二)材料与试剂 1.马脾铁蛋白 2.硫酸铵 3.硫酸镉 4.双异氰酸镉二甲苯(Metaxylene dlisocyante ,XC)以0.30mol/...
(一)原理 酶免疫电镜技术是利用酶的高效率的催化作用对其底物的反应形成不同的电子密度,借助于电子显微镜观察,证明酶的存在,从而对抗原进行定位。 (二)材料与试剂 1.PBS液取NaCl 8.5g,Na2HPO40.85g,KH2PO40.54g,加水至1 000ml即可。 2.DAB溶液取5...
1、 包埋后染色 (超薄切片的金标记法) (1)超薄切片厚50~70nm左右,载于200~300网孔的镍网上; (2)滴1%的H2O2液1滴于蜡板上,将网的载片面轻浮于液滴上10min至1h; (3)双蒸水洗3次,每次10分钟。第1、2次洗法如(2),浮于液面上,第3次以盛双蒸水的注...