细胞培养基的种类繁多,细胞培养方式也较多,如何正确地使用培养基及最大程度地保持培养基的营养以维持细胞的生长,对每个细胞培养工作者都很重要。培养基的使用依据不同的培养基种类、培养方式、细胞种类的不同而存在差异。 1、细胞培养液的构成 细胞培养液...
支原体是一种大小介于细菌和病毒之间(最小直径0.2um)并独立生活的微生物。约有1%可通过滤菌器。支原体无细胞壁形态呈高度多形性。可为圆形、丝状或梨形。 支原体形态多变,在光境下不易看清内部结构。电镜下观察支原体膜为三层结构。其中央有电干密度大的密...
一、污染的清除 培养细胞一经污染,多数较难处理。如果污染细胞价值不大,宜弃之;有细胞株留存的或可购置的,可在寻找原因后彻底消毒操作室,复苏或重新购置细胞,再培养。若污染细胞价值较大,又难于重新得到,可采取以下办法清除。 1、使用抗生素 抗生素对...
六.血清的灭活 细胞培养常用的是小牛血清,新买来的血清要在56℃ 水浴中灭火30分钟后,再经过抽滤方可加入培养基中使用。 七.HEPES溶液 HEPES的化学全称位羟乙基呱嗪乙硫磺酸(N-a-hydroxythylpiperazine-N- ethanesulfanic acid )。对细胞无毒性作用。它是...
器材与试剂 干粉型培养基、胰蛋白酶,青霉素、链霉素. 纯净水系统、电子天平、PH计、磁力搅拌器。 具体步骤 一. 水的制备 细胞培养用水必须非常纯净,不含有离子和其他的杂质。需要用新鲜的双蒸水、三蒸水或纯净水 二.PBS的制备与消毒(也可用于其它BSS,如:H...
十六、各位老师,有几个关于多聚赖氨酸包被培养板的问题请教 1、pll到底溶于硼酸缓冲液还是溶于三蒸水或双蒸水 2、使用前是用灭菌的去离子水稀释吗,可不可以用双蒸水或别的 答:多聚赖氨酸溶于硼酸缓冲液或者无菌培养用水; 多聚赖氨酸包被培养板使用前是用...
因为自己做PC12细胞培养,想在接种前将培育皿用多聚赖氨酸包被,到论坛里搜索了下,关于多聚赖氨酸的帖子不少,看了一些帖子,将大部分收集在此。个人觉得关于多聚赖氨酸的配置、保存、使用各方面问题,这些帖子里面都解释了。 注:我只是摘了一个帖子里某段...
基本原理:本文分离单核细胞所用方法是Percoll非连续性密度梯度离心法,主要是根据不同细胞间密度的差别进行细胞分离。此法易操作,且使用通常的实验设备即可完成。 试剂与器材 外周血单个核细胞 PBS 1和PBS 10(无Ca2+、Mg2+),含0.5mM EDTA 胎牛血清(56℃...
4、从3中所获得的中性粒细胞进行纯化 1)因为方法3只能获得80-85%纯度的中性粒细胞,可以把方法2与方法3联合对中性粒细胞进行纯化。 2)收集从方法3 dextran沉降所得到的富含白细胞的血浆,275g*6min,离心。 3)管底沉淀用2ml PPP重悬 4)在一15ml离心管中...
血细胞由红细胞,白细胞,血小板等组成.实验中常用白细胞来做研究,如炎症渗出,细胞迁移,识别等都涉及到白细胞.白细胞又分为:粒细胞,淋巴细胞,单核细胞等.它们具有不同的功能.实验中常需要分离血细胞方能进行。 这里主要论述人外周白细胞的分离,主要是中性粒细...