为了获得全长的cDNA 5及3末端序列，许多研究人员使用了称之为cDNA末端快速扩增，或RACE的方法。传统的RACE方法得到的PCR产物含有全长及断裂的cDNA产物。GeneRacer试剂盒确保您只得到含有全长cDNA末端的完整序列，是您得到更高效的结果并节省您的时间 GeneRace...

【实验原理】 将RNA变性及电泳分离后，转移到固相支持物上，用于与DNA探针杂交以鉴定其中特定 RNA分子的大小与含量。基本原理与Southern印迹相同，但RNA变性方法与DNA不同，不能用碱变性，因为碱会导致RNA的水解。 Northern印迹主要用于组织细胞靶基因表达水...

3.免疫探测 包括被转印到膜上的靶抗原与第一抗体（特异抗体）反应、与酶标第二抗体 (抗抗体) 反应，以及用酶相应的底物处理后进行靶蛋白（抗原）信号检测。 （1）用0.01mol/L PBS洗膜，5min3次。 （2）加入封闭液（5％脱脂奶粉或2％牛血清白蛋白），浸泡被转...

【实验原理】 Western Blot（蛋白质印迹或免疫印迹）技术，以蛋白质为检测对象，探针是抗体，显色用标记的二抗。实验采用聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）将样品蛋白质分离，再转移到固相载体（PVDF尼龙膜或NC膜）上；固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且保持电...

Northern杂合反应的步骤主要包括： （1） 加入核酸探针，使与固定于尼龙膜上的特定RNA 进行杂合反应； （2） 待杂合反应结束后以含盐缓冲液与SDS 洗掉非专一性结合于尼龙膜上的核酸探针。 进行反应时应注意下列几个问题： a. 实验操作过程仍应尽可能避免RNase...

要进行Northern杂合反应前，必须先将RNA自洋菜胶体转移至硝化纤维纸（nitrocellulose membrane） 或尼龙膜 （nylon membrane） 上，这一个过程称为转印 （blotting）。 一般常用的方法包括毛细管转移法 （capillary transfer）、真空转移法 （vacuum transfer...

二、将变性RNA转移至硝酸纤维素滤膜 电泳完毕后，可立即将乙醛酰RNA自琼脂糖凝胶转移至硝酸纤维素滤膜，有以下几种转移方法：毛细管洗脱法、真空转移法和电印迹法。毛细管洗脱法如下所述， 真空转移法和印迹法则按有关仪器生产厂家产品说明书进行。尽管有人认...

一、经乙二醛和二甲基亚砜变性处理后进行的RNA电泳 这一方法原于McMaster和Carmichael（1977）。含有乙二醛－DMSO的凝胶比含有甲醛的凝胶更难于进行电泳，因为前者泳动速率较慢而且需将电泳液时行循环以避免电泳过程中形成过高的H+梯度。尽管上述两种凝胶具有...

人、小鼠和大鼠的多种组织来源的高质量mRNA,经电泳分离后预转于尼龙膜上预制的即用型Northern杂交膜，免去RNA电泳操作过程 可检测范围：0.5-10kb 可重复使用 提供ExpressHybTM快速杂交液样品 可靠的优良品质 从1991年始，公司就向广大的生命科学研究者提供高...

第二天： 将上述物品揭开，将胶正面朝下，膜正面朝上，用铅笔作好标记。 将胶浸泡在EB中1-2分钟，用DEPC H2O清洗，将膜放在滤纸上面，夹好，4度下保存，或者直接进行预杂交。 UV杂交（有助于RNA结合到膜上面）。 五、预杂交和杂交 预杂交和杂交 buffer： 100u...