免疫学检测的干扰因素和处理策略专家共识

干扰因素3

• 内源性干扰因素
  • 嗜异性抗体：能与各种动物制成的生物制剂的抗体结合，标记抗原或者抗体，干扰测定，使检测结果出现假阳性或者假阴性。
  • 自身免疫病抗体和补体：自身抗体对检测会产生负相关影响。补体在免疫检测系统中，会使捕获抗体向标记抗体标记过程中抗体分子发生变构，造成假阳性。
  • 交叉物质：类地高辛、类 AFP 物质等与交叉的靶抗原有交叉反应，人工合成的摄入物质如脑利钠肽药物对 BNP 的检测也有交叉反应，从而干扰检测。
• 外源性干扰因素
  • 溶血：标本溶血时释放大量过氧化物酶活性的血红蛋白，其细胞碎片以及蛋白质会对定性检测产生误差，血红蛋白的过氧化物酶活性在以辣根过氧化物酶标记的显色反应中，会导致非特异性显色。
  • 脂血：血脂中的 CM 和 VLDL 悬浮颗粒使标本产生浑浊、凝集现象，对检测中使用比浊法的项目造成较大干扰，影响光散射，增加标本内物质的极性和非极性。
  • 纤维蛋白：血液标本若未完全凝固就强行离心分离血清，标本内残留的部分纤维蛋白形成的纤维蛋白块，会引起假阳性判断。
  • 标本污染及保存时间：检测标本被细菌污染，细菌体内的内源性过氧化氢酶会产生非特异性显色干扰结果。存放时间过久的标本，血清中 IgG 可聚合成多聚体、AFP 可形成二聚体，会导致本底过深、甚至造成假阳性；抗原或抗体免疫活性减弱，则可能出现假阴性。
  • 生物素：在三明治法检测中，血清或血浆标本中极高剂量的游离生物素，会与未标记的生物素化抗原结合链霉素，导致检测结果高于实际检测结果；竞争法检测中也会因游离生物素的存在影响检测信号。

处理策略4

• 针对内源性干扰因素
  • 类风湿因子：使用类风湿因子吸附剂去除，降低其对免疫学检测的干扰。
  • 人抗动物抗体和嗜异性抗体：通过使用阻断剂来降低其影响。
  • 自身抗体：采取措施降低其对检测的干扰，具体方法根据不同的自身抗体类型有所差异。
  • 补体：可通过 EDTA 及加热的方式灭活补体来去除其干扰。
  • 交叉反应物质：选择特异性强的抗体，采用凝胶色谱层析法从标本中提取待测物后再进行检测。
• 针对外源性干扰因素
  • 溶血：采集和处理标本时应避免溶血，若已溶血，应重新采集标本。
  • 脂血：可采取超速离心、吸附剂处理等方法去除脂质，降低其对检测的影响。
  • 纤维蛋白：规范标本离心前的处理，确保血液标本完全凝固后再离心分离血清。
  • 标本污染及保存时间：严格无菌操作，保证标本无污染；按照规定的时间和条件保存标本，避免标本存放过久。
  • 生物素：对于使用生物素 - 亲和素系统的检测方法，可在检测前评估患者生物素摄入情况，必要时调整检测策略或使用去生物素化试剂处理标本。