1、材料 Dienes染色液,1.5%毛地黄皂苷液。 2、方法 (1)Dienes菌落染色:Dienes染色液是将2.5g亚甲蓝、1.5g天青II、10g麦芽糖、0.5g碳酸钠溶于100ml蒸馏水中。染色时直接吸入染色液覆盖菌落上1min左右,用生理盐水洗去染色液后,在低倍显微镜下可见支原体菌...
(6)代谢抑制试验:根据特异性抗体能阻止支原体的生长及代谢这一特性,可采用已知高效价的免疫血清进行代谢抑制试验 以鉴别各种支原体。测定分解葡萄糖支原体时,可在含0.51.0%葡萄糖的支原体培养基中加入抗血清后再接种菌液,培养后未见发酵反应,培养基颜...
由于支原体种类不同,应采取不同的方法进行检测,常用的方法有如下几种。 1、观察细胞的形态和生长特征 支原体污染比较严重时可出现生长减慢,有的培养基pH明显变酸,并出现细胞病变,其病变特征与病毒感染相似,因此不能准确诊断。 2、分离培养法 大多数支原...
细胞培养中最令人头疼的问题之一是微生物的污染,而支原体的污染更给人一种看不见摸不着的感觉。长期以来,这个问题一直令细胞培养工作者困惑。在人们日常生活的工作环境中,支原体可以说无处不在,它可以通过人的毛发、口腔、穿着的衣服、动物的皮毛以及日常...
培养法最为可靠且成本低廉,但培养周期较长。常用于细胞以及I临床治疗细胞的支原体检查。 1、所需仪器设备及培养基 (1)仪器设备:培养箱,显微镜。 (2)培养基 ①支原体肉汤培养基。 ②精氨酸肉汤培养基。 ③支原体琼脂培养基。 2、检查方法 (1)样品的贮...
PCR法是20世纪80年代中期建立起来的一种体外DNA扩增技术,其基本原理是酶促DNA合成反应,即在DNA模板、引物和脱氧核糖核酸存在下,经DNA聚合酶的作用,使DNA 链扩增延伸。该方法具有灵敏度高、特异性强、快速的特点,但其对实验环境的要求严格,实验成本较高...
1、原理 利用电子显微镜的超级放大功能,可直接观察培养细胞中支原体污染情况。 2、操怍方法 ①细胞传代至贴有盖玻片的平皿中;②培养24h取出;③PSB洗涤;④2.5%戊二醛/ PSB固定15min,PSB洗涤;⑤1%锇酸固定30min,PSB洗涤;⑥乙酸异戊酯脱水;⑦冰点干燥;...
支原体是一群目前所知能独立生活的最小原核细胞型微生物。无细胞壁,具高度多形性,最小个体直径200nm左右,可以通过滤菌器。在无生命的人工培养液中能生长繁殖,但营养要求高于一般细菌,在固体培养液中形成直径为1015u的小菌落,分中央与边缘两部分,中央部...
【原理】 支原体形态多为球形小颗粒和较短的丝状体,不易鉴别。 溶脲脲原体(Uu)在含95%氮气和5%二氧化碳环境中生长良好。其生长最适pH为5.56.5,最适温度为3637℃。Uu具有脲酶,能分糖尿素产氨,使含酚红指示剂的Uu液体培养液pH上升,颜色由黄色变为红色。...
溶脲脲原体(Uu)和人型支原体(Mh)是常见的致病性泌尿道支原体。根据支原体不同生化反应特性和对特定物质的不同抵抗力可用于分离鉴定支原体。 【原理】标本分别接种于支原体鉴别培养液内。溶脲脲原体可产生脲酶,使分糖产氨,培养液呈碱性,指示剂由黄色变...