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  • RT-PCR实验方法大全(抽提RNA,RT,PCR)-22017-10-15 19:03:18

    关于平台期和线性期的问题,实际上线性期是指数期,只不过碰巧2的冥和2的倍数是相同的。看上去任何一个时期都可以,实际上是不对的,因为牵涉到酶促动力学的问题,这个我也不懂,有一些专门的文章,好像,涉及到很多化学的东西。我们学医的,也没必要知道那些...

  • RT-PCR实验方法大全(抽提RNA,RT,PCR)-12017-10-15 19:02:32

    RT-PCR实验有三步:抽提RNA,RT,PCR。 要求: 1.做RT前必需测RNA浓度,逆转录体系对RNA量还是有一些要求,常用500ng或1ug。 2. RT按要求做,一般不会出太大问题。 3. PCR,按常规。但如需扩长片段,则对前两步要求较高,需要有完整的cDNA存在,不是单改变Mg2...

  • RT-PCR技术简介和RT-PCR引物的选择2017-10-15 19:01:47

    RT-PCR简介 RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA,再以cDNA为模板,扩增合成目的片段。RT-PCR技术灵敏而且用途广泛,可用于检测细胞中基因表达水平,细胞中RNA病毒的含量和直接克隆特...

  • RT-PCR常见问题分析及其解决方案2017-10-15 19:01:01

    常见问题 可能原因 建议解决方案 少量或没有 RT-PCR 产物 RNA 被降解 分离无污染,高质量的 RNA ;提取 RNA 的材料要尽量新鲜,防止 RNA 降解; RT 反应前,在变性胶上分析 RNA 的完整性; RNA 提取后,应储存在 100 %甲酰胺中, 如果使用 RNase 抑制剂,加...

  • 原位PCR和原位RT-PCR操作规程2017-10-15 19:00:15

    (一)、仪器设备 英国Thermo Hybaid原位PCR仪。 (二)、操作流程 1、原位PCR步骤 1)预处理: (1)切片常规脱蜡; (2)0.2mol/L HCl处理10min; (3)5g/ml蛋白酶K消化组织37℃10min; (4)Nase消化组织37℃ 30min; (5)梯度酒精脱水,室温干燥。 2)...

  • 动脉炎病毒属2017-10-15 18:58:53

    动脉炎病毒属(Arterivirus)?该属病毒为非虫媒病毒,马动脉炎病毒(EAV)为其代表种,此外,还包括其它3种病毒:乳酸脱氢酶增高症病毒(LDV)、猪生殖和呼吸系统综合症病毒(PRRSV)以及猴出血热病毒(SHFV)。目前尚未发现其它新成员。? 1.形态特征?动脉炎病毒粒子...

  • 马动脉炎病毒2017-10-15 18:58:06

    马动脉炎病毒?(Equinearteritisvirus,EAV)?马传染性动脉炎(EA)的临床特征是病马发热,步态僵直,躯干及眼周围水肿,出现粘液?脓性鼻炎,外生殖道水肿,妊马流产。本病在厩舍内迅速传播,公马也可接触感染。?1957年,美国Doll等人从俄亥俄州发生的以母马流...

  • 马动脉炎病毒(二)2017-10-15 18:57:20

    5.抵抗力?病毒粒子有一层脂质囊膜,所以对乙醚、氯仿等脂溶剂敏感。去氧胆酸盐易使EAV灭活。病毒在低温条件下极稳定,但不耐热。-30℃保存7年仍有活性,4℃可存活35天,但在37℃下仅能存活2天,而56℃30分种就可使其灭活。病毒对酸敏感。对0?5mg/ml浓度的胰...

  • 猪生殖和呼吸系统综合症病毒?2017-10-15 18:56:34

    猪生殖和呼吸系统综合症病毒?(Porcinereproductiveandrespiratorysyndromevirus,PRRSV) 猪生殖和呼吸系统综合症(间称PRRS)是近十年来发现的一种新的猪传染...

  • 猪生殖和呼吸系统综合症病毒致病性2017-10-15 18:55:48

    猪生殖和呼吸系统综合症病毒致病性? 6.致病性?猪是唯一感染PRRSV并出现临床症状的动物。病毒主要侵害繁殖母猪及其仔猪,造成严重的母猪繁殖障碍和小猪呼吸系统疾病,也可造成公猪的精液品质下降,而育肥猪发病多数比较温和。母猪感染后的症状比较明确,主要...

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