1、主要试剂 (1)羊抗人C4抗血清 按说明书所示单扩效价扩大2-4倍稀释,或分别用含不同浓度抗体的琼脂糖凝胶浇板,选择峰高、清晰度适当的抗体浓度为最适工作浓度; (2)羊抗人B因子抗血清 按说明书所示单扩效价扩大3-5倍稀释,也可按选择C4抗血清稀释浓度的...
1、原理 用神经氨酸酶和羧肽酶B处理EDTA抗凝血浆,神经氨酸酶的作用主要是去涎,羧肽酶B能切除分子p链C端的碱性氨基酸,去除副带,将经过两酶处理后的 EIJE4抗凝血浆进行高压电泳,然后与抗C4血清作用形成沉淀带,将其漂洗后用考马斯亮蓝染色,参照第六届国际...
一﹑原理 溶血空斑实验是体外检测单个抗体形成细胞(B淋巴细胞)的一种方法,即将经绵羊红细胞(SRBC)免疫过的家兔淋巴结或小鼠脾脏制成细胞悬液,与一定量的SRBC结合,于37℃作用下,免疫活性淋巴细胞能释放出溶血素,在补体的参与下,使抗体形成细胞周围的...
血清中有免疫复合物存在时,可与其本身的C1(内源性C1)结合。将被检血清56℃加热1h,能破坏结合的C1,空出补体结合位点。当加入豚鼠血清(外源性C1)及指示系统(致敏SRBC)时,CIC又可与外源性C1结合,使致敏SRBC的溶血被抑制。 1、试剂 (1)缓冲生理盐水...
聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)是一种无电荷的直链大分子多糖,可非特异性地引起蛋白质沉淀。沉淀具有可逆性,被沉淀的蛋白质生物活性亦不受影响。不同浓度的 PEG可沉淀分子量不同的蛋白质,在pH值、离子浓度等条件固定时,蛋白质分子量越大,用以沉淀...
一、补体C2遗传多态性的检测 人类补体C2基因位于第6号染色体短臂的HLA区,与Bf紧密连锁。C2、Bf、C4共同构成补体单倍型,C2的缺乏可导致一些疾病的发生。C2的遗传多态性主要为C2*C(C:common)、C2*B(B:basic)、C2*A(A:acidic)、C2*QO(QO:Quantify Z...
1、原理 补体能使抗体致敏的羊红细胞发生溶血反应,根据溶血程度可测定补体总活性。以溶血百分率作纵坐标,相应的血清量为横坐标绘图,可知在50%溶血附近补体的量与溶血程度呈直线关系。因此以50%溶血作为终点较以100%溶血作为终点更为敏感。故称为50%溶血试...
可溶性抗原,如蛋白质、多糖、类脂质和病毒等,与相应抗体结合后,抗原抗体复合物可以结合补体,但这一反应肉眼不能察觉,如再加入红细胞和溶血素,即可根据是否出现溶血反应来判定反应系统中是否存在相应的抗原或抗体。这个反应就是补体结合反应。 补体结合...
C3是由和两条肽链通过二硫键连结组成,为1球蛋白,沉降系数9.5s,分子量180kD,含糖量约占2.2%,是血清中含量最多的补体成分,约占总补体含量的1/3以上,在补体系统激活过程中,无论是经传统途径还是旁路途径,均需C3活化后,才能推进后续补体成分(C5~C9)...
细胞受体结合免疫测定法是根据CIC可与某些细胞表面的Fc受体或补体受体结合而建立的细胞技术,这类方法有灵敏度较高,特异性较强等优点,但需进行活细胞培养或细胞分离,影响因素多,重复性较差,目前仅适用于实验研究。此类技术有多种方法。 Raji细胞是从Burk...