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  • 免疫原(immunogen)的制备2017-10-12 19:08:10

    一、 颗粒性抗原的制备 颗粒性抗原是指细胞抗原或细菌抗原。 二、 可溶性抗原的制备和纯化 (一) 组织和细胞抗原的粗制 1. 新鲜的组织或器官,经高速组织捣碎机研磨、酶消化、离心等手段,而获得单个细胞。 2. 组织细胞或培养细胞可溶性抗原的制备 (二) 离...

  • 多克隆抗体(polyclonal antibody)制备2017-10-12 19:07:28

    1. 免疫动物:两只新西兰兔 2. 佐剂:首先用完全弗氏佐剂(CFA),后用不完全弗氏佐剂(IFA)。 3. 免疫原:蛋白或KLH偶联的多肽。每次免疫100-200g免疫原。 4. 免疫:用生理盐水稀释免疫原,然后与相应的佐剂进行1:1混合。抗原和佐剂完全混合形成稳定的乳剂...

  • 实验动物(experimental animal)免疫方案2017-10-12 19:06:44

    1、抗原: 蛋白质、多肽、细胞器、细胞、组织等。 2、免疫方式:皮下注射、腹腔注射、静脉注射、肌肉注射等。 3、不同动物免疫所需抗原量(以蛋白免疫为例) 动物 抗原量 兔子 20-200ug 小鼠 2-40ug 大鼠 10-50ug 绵羊 100-1000ug 母鸡 20-200ug 单位:微克 4...

  • 多克隆抗体技术(Polyclone antibodies preparation technique)2017-10-12 19:05:55

    (3)脂质体:是人工制备的类脂质的小球体,由一个或多个酷似细胞膜的类脂双分子层组成,这种结构使其能够携带各种亲水的、疏水的和两性物质,他们被包裹在脂质体内部的水相中,或插入类脂双分子层或吸附、联接在脂质体的表面,起到明显的免疫增强作用。 (4...

  • 多克隆抗体技术(Polyclone antibodies preparation technique)2017-10-12 19:05:15

    一、多克隆抗体的概念 抗原刺激机体,产生免疫学反应,由机体的浆细胞合成并分泌的与抗原有特异性结合能力的一组球蛋白,这就是免疫球蛋白,这种与抗原有特异性结合能力的免疫球蛋白就是抗体。 抗原通常是由多个抗原决定簇组成的,由一种抗原决定簇刺激机体,...

  • 抗体的保存2017-10-12 19:04:26

    一、腹水 腹水重组后可加入少量叠氮纳等来阻止细菌生长。腹水应当冻存。单抗最好能够小包装保存以避免反复冻融。若要保存较长时间,则不要在4℃。和血清不同,腹水中含有蛋白酶,会使抗体效价下降,因此加入蛋白酶抑制剂可以选择。 二、纯IgG 不要稀释抗体后...

  • 抗体(antibody)的功能2017-10-12 19:03:41

    一、识别并特异性结合抗原(Recognition and bind antigen specifically ) 识别并特异性结合抗原是免疫球蛋白分子的主要功能,这种特异性主要是由免疫球蛋白V 区的空间构型所决定。免疫球蛋白分子有单体、二聚体和五聚体等几种所谓的体形式。只有1 个Y 形分...

  • 抗原多肽设计和选择的基本原则2017-10-12 19:02:58

    一、抗原多肽设计的基本原则 为了使生产抗体获得最佳效果,仔细地设计抗原多肽是很有必要的,设计应满足一个基本条件:在免疫过程中,该抗原既不会产生过强的免疫反应,同时又能产生出对感兴趣的蛋白有结合能力的抗体。尽管抗原设计是一个很复杂的课题,有诸...

  • SELEX技术——抗体工程的新纪元 22017-10-12 19:02:14

    4、异质性程度更高 随机寡核苷酸文库中每一条随机寡核苷酸,其随机区的每个核苷酸位置都存在四种可能性,如果随机区有n个核苷酸,那么随机序列的多样性有n4种,再加上稀有碱基或人为修饰碱基,随机序列的多样性会更多。一般随机区域的长度为30个核苷酸左右,...

  • SELEX技术——抗体工程的新纪元 12017-10-12 19:01:32

    回顾20世纪,分子生物学及其相关学科的发展给科学研究和人类生活带来了日新月异的变化,同时也更新了一些传统概念。比如,自20世纪30年代以来,人们一直认为所有的酶都是蛋白质。1986年,Lerner等首次研制成功催化水解羧酸酯的抗体,称之为抗体酶(Abzyme)。...

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