SPA提取的方法很多，包括煮沸法、溶菌酶法、葡萄球菌溶素法、超生波法以及三氯醋酸法等。现将常用的方法介绍如下： 1．煮沸提取法 ⑴ 将菌株接种于蛋白胨葡萄糖琼脂培养基上，37℃培养20h~24h。 ⑵ 以0.15mol/L pH5.9PB液将菌苔洗下，配成10%(V/V)的悬液。 ⑶...

一、实验目的 酶是植物体内具有催化作用的蛋白质，植物体内的生化反应，一般都是在酶的作用下进行的，没有酶的催化反应，植物的生命也就停止了，因此对酶的研究是阐明生命现象本质中十分重要的部分。为要研究酶首先要将酶从组织中提取出来，加以分离、纯化，...

大肠杆菌表达蛋白以可溶和不溶两种形式存在，需要不同的纯化策略。现在，许多蛋白质正在被发现而事先并不知道它们的功能，这些自然需要将蛋白质分离出来后，进行进一步的研究来获得。 分析蛋白质的方法学现已极大的简化和改进。必须承认，蛋白质纯化比起DNA...

一、实验目的 1.掌握酶分离纯化的一般步骤及相关原理； 2.悉碱性磷酸酶的分离纯化的方法步骤。 二、实验原理 有机溶剂分级沉淀是分离蛋白质的常用方法之一。有机溶剂能使许多溶于水的酌生物大分子发生沉淀，其主要作用是降低水溶液的介电常数。例如20℃时水的...

一、实验目的 熟悉植物叶蛋白的几种提取原理和方法，了解其意义及其应用价值。 二、实验原理 植物叶蛋白或称绿色蛋白浓缩物 (leaf protein concentration，简称LPC)，是从新鲜植物叶片中提取的高质量浓缩蛋白质，不仅是畜禽生长发育和生产畜产品的主要营养物...

一、实验目的 1、掌握一种提取蛋白的方法。 2、掌握一种检测牛乳质量的方法。 二、 实验原理 酪蛋白是乳蛋白质中最丰富的一类蛋白质，约占乳蛋白的80～82%，酪蛋白不是单一的蛋白质，是一类含磷的复合蛋白质混合物，以一磷酸酯键与苏氨酸及丝氨酸的羟基相结合...

一) 原理 将SPA偶联至Sepharose-4B上后，利用亲和层析来提取人和某些动物的IgG，这样可以省去制备第二抗体。该法特别适用于单克隆抗体的研究。该法提取IgG与利用IgG纯化SPA原理是一致的。 (二) 材料与试剂 1．Sepharose－4B 琼脂糖 2．SPA 3．溴化氰 4．0.10M...

（一） SPA的提取 SPA提取的方法很多，包括煮沸法、溶菌酶法、葡萄球菌溶素法、超生波法以及三氯醋酸法等。现将常用的方法介绍如下： 1．煮沸提取法 ⑴ 将菌株接种于蛋白胨葡萄糖琼脂培养基上，37℃培养20h~24h。 ⑵ 以 0.15mol/L pH5.9PB液将菌苔洗下，配成1...

（一）试剂及配制 1．饱和硫酸铵液 2．各种磷酸盐缓冲液 ⑴ 0.2mol/L原液 ⑶ 0.005Mol/L pH8.0 PB 液 取0.10Mol/L pH8.0 PB液100ml，加H2O至2 000ml ⑷0.025 Mol/L pH8.0 PB 液 取0.10Mol/L pH8.0 PB液500ml，加水至2 000ml。 ⑸ 0.035 Mol/L pH8.0 PB液 取0....

⑴ 区带电泳：玻片琼脂或醋酸纤维膜电泳均可。加样电泳后，只在球蛋白的迁移部位出现一条带。操作时，同时可用全血清样品，不同浓度 (NH4)2SO4盐析样品进行电泳，以资比较。 ⑵ 琼脂双相双扩散鉴定：预先准备该IgG免疫异种动物所获的抗IgG血清。将IgG与抗 IgG...