一、实验目的: 1、通过氨基酸的分离,学习并掌握纸层析 的原理和操作技术; 2、掌握分配层析法; 3、掌握影响分配系数的因素。 层析分离技术是利用被分离的混合物中各组分物理化学的性质(分子的形状和大...
(五)离子交换层析介质的技术数据 离子交换介质名称 最高载量 颗粒大小(m) 特性/应用 pH稳定性工作 耐压 (MPa) 最快 流速 (cm/h) SOURCE 15 Q 25mg 蛋白 15 2~12 4 1800 SOURCE 15 S 25mg 蛋白 15 2~12 4 1800 Q Sepharose H.P. 70mg BSA 24~44 2~1...
凝胶过滤介质名称 分离 范围 颗粒 大小 (m) 特性/应用 pH 稳定性 工作 干凝胶 溶胀体积 (mL/g) 溶胀最少 平衡时间(h) 最快 流速 (cm/h) 室温 沸水 SephadexG-10 SephadexG-15 SephadexG-25 Coarse SephadexG-25Medium SephadexG-25 Fine SephadexG-25...
(三) 琼脂糖凝胶的技术数据 ( 琼脂糖是琼脂内非离子型的组分,它在0 ~ 4℃,pH 4~9范围内是稳定的。) 名称、型号 凝胶内琼脂糖百分 含量(W/W) 排阻的下限(Mr) 分级分离的范围(Mr) 生产厂商 Sagavac 10 Sagavac 8 Sagavac6 Sagavac4 Sagavac2 10 8...
一) 离子交换纤维素 目前常用的离子交换纤维素列于下表 DEAE- 纤维素 形状 长度 (微米) 交换当量 (毫克当量/克) 蛋白吸附容量 (毫克/克) 床体积(毫升/克) 胰岛素(pH8.5) 牛 血清清蛋白(pH8.5) pH6.0 pH7.5 DE-22 DE-23 DE-32 DE-52 CM-纤维素...
五. 操作步骤 1. 层析柱的准备 (1) 清洗:每组取一支层析柱,用清水冲洗干净。 (若玻璃柱较脏,应卸去塑料装置,先入洗液中浸泡2小时。) (2) 安装与检查:检查出口装置中尼龙绸或烧结滤板是否完好干净。安装层析柱,让其垂直固定于滴定台架上。对准出口处,...
一. 目的 学习凝胶层析的工作原理和操作方法 掌握利用葡聚糖凝胶层析进行蛋白质脱盐的技术 二. 原理 凝胶层析又称凝胶过滤或排阻层析。凝胶过滤的主要装置是填充有层析介质的层析柱。 1. 层析介质的特点 (1)遇水为不溶解的固相; (2)是化学惰性物质; (3...
一、基本原理 是指混合物随流动相流经固定相的层析柱时,混合物中各组分按其分子大小不同而被分离的技术。固定相是凝胶。凝胶是一种不带电荷的具有三维空间的多孔网状结构,凝胶的每个颗粒内部都具有很多细微的小孔,如同筛子一样,小的分子可以进入凝胶网孔...
在分配层析中,大多选用多孔物质作为支持物,利用它对极性溶剂的亲和力,吸附某种极性溶剂作为固定相;用另一种非极性溶剂作为流动相。如果把待分离的混合物样品点在多孔支持物上,在层析过程中,非极性溶剂沿支持物流经样品点时,样品中的各种混合物便会按分...
层析技术是近代生物化学最常用的分离技术之一。它是利用混合物中各组分的理化性质(吸附力、分子形状和大...