原理 凝胶渗透色谱就是按照溶质分子的大小不同而进行分离的一种色谱技术,当溶质分子大小不同的样品溶液通过凝胶柱时,由于凝胶颗粒内部的网络结构具有分子筛作用,分子大小不同的溶质就会受到不同的阻滞作用,本实验血红蛋白分子量大,不易渗入网络,被排阻...
一.概念 利用混和物中各组分理化性质(吸附力、分子形状、大...
(一)层析技术 层析法是利用不同物质理化性质的差异而建立起来的技术。可分为吸附层析法、分配层析法、离子交换层析法、凝胶层析法、亲和层析法、高效液相层析法等。 在层析法中,根据层析峰的位置及峰高或峰面积,可以定性及定量。层析法与光学、电学或电化...
方案一 连续蔗糖梯度:日立CPMX或WX系列离心机,P40ST转头13PET管或13PA管。 单管配置: 1)13PET管:20%-50%(W/W)连续蔗糖梯度。 用0.01M Tris-Hcl配置蔗糖梯度:用20%,25%,30%,35%,40%,45%,50%(W/W)蔗糖液各1.5ml,从离心管低部逐层向上铺设(底...
所分离的颗粒大小和密度相差较大:常速、高速离心;若从样品液中分离2种以上大小和密度不同的颗粒:差速离心;超速离心:差速离心法和密度梯度离心法,后者又分速率区带离心和等密度离心。 1、 差速离心 采用不同离心速度与时间,使不同沉降速度的颗粒分批分离;...
在分离分析特别是蛋白质分离分析中,层析是相当重要、且相当常见的一种技术,其原理较为复杂,对人员的要求相对较高,这里只能做一个相对简单的介绍。 一、 吸附层析 1、 吸附柱层析 吸附柱层析是以固体吸附剂为固定相,以有机溶剂或缓冲液为流动相构成柱的一...
一、凝胶过滤色谱: 一般来说,凝胶过滤色谱的结果好坏直接取决于凝胶柱的柱效(每米多少理论塔板数),而影响柱效的因素主要有: 1、凝胶本身性质: 每一种凝胶均有其合适的分离范围,应选择合适的凝胶进行分离。同样分离范围的凝胶颗粒越细的,柱效越高。 2...
离心是蛋白质、酶、核酸及细胞亚组分分离的最常用的方法之一,也是生化实验室中常用的分离、纯化或澄清的方法。尤其是超速冷冻离心已经成为研究生物大分子实验室中的常用技术方法。 离心机(centrifuge)是实施离心技术的装置。离心机的种类很多,按照使用目的...
离心机类型 通常所使用的离心机根据转子转速大小的不同可分为普通离心机、高速离心机和超速离心机三类。 (1)普通离心机 一般来说,最大转速不超过6000r/min 者属普通离心机;如国产的801型,LXJⅡ型等。离心机转速与相对离心力的测算,如图237。 普通离心机转...
最大速度方法 (1)移动界面超速离心法 含几个组分的样品在足够高的离心场中离心时,每种颗粒都达到其最大沉降速度,这时样品开始分离。离心管的上层逐渐形成透明的上清液,并形成对应于样品各组分的一系列浓度界面,界面的移动相对于每种组分来说是特征的。 虽...