骨与软组织肿瘤二代测序中国专家共识（2021 年版）核心要点

一、核心定位与适用范围

• 适用人群：骨与软组织肿瘤（含肉瘤、交界性 / 良性肿瘤）患者，聚焦疑难诊断、靶向 / 免疫治疗、临床试验入组、复发难治病例。
• 核心价值：弥补传统病理（形态 + IHC+FISH / 一代测序）的不足，实现分子分型、驱动基因鉴定、治疗靶点筛选、预后分层。

二、诊断相关推荐（共识 1–3）

1. 诊断场景与指征

• 共识 1：常规病理（IHC/FISH）不能明确诊断的骨与软组织肿瘤，推荐 NGS 检测（如小圆细胞未分化肉瘤、双表达 CD34/S-100 梭形细胞肿瘤等）。
• 共识 2：常规分子检测（FISH / 一代测序）结果阴性，推荐DNA+RNA 联合 NGS复检（提高融合 / 重排检出率）。
• 共识 3：常规分子与 NGS 结果不一致，推荐第 3 种方法（如 Sanger、FISH、数字 PCR）验证。

2. 关键分子诊断靶点（示例）

三、治疗相关推荐（共识 4–6）

1. 靶向治疗（共识 4）

• 推荐拟接受特异性靶向治疗的患者，用 NGS 验证靶点基因（如NTRK、ALK、ROS1、BRAF、KIT、PDGFRA、MDM2、CDK4等）。
• 已获批 / 指南推荐药物：安罗替尼、帕唑帕尼、瑞戈非尼、伊马替尼等。

2. 免疫治疗（共识 5）

• 进展期患者：IHC 测 PD-L1 + NGS 测 MSI、TMB，辅助免疫治疗决策。
• 关键指标：
  • MSI-H/dMMR、TMB-H（≥10 mut/Mb）：为泛瘤种免疫治疗标志物（肉瘤中发生率低，约 5%）。
  • PD-L1 表达在肉瘤中疗效预测价值有限。
   

3. 临床试验（共识 6）

• 推荐既往治疗失败、无有效方案的患者行 NGS，寻找匹配的靶向 / 免疫临床试验机会。

四、样本与检测规范（共识 7–9）

1. 样本要求（共识 7）

• 优先组织样本：新鲜 / 冷冻组织（离体 30min 内固定）、FFPE（肿瘤细胞 > 20%、坏死 < 10%）。
• 骨组织特殊处理：避免酸脱钙；建议 EDTA 脱钙或留取未脱钙组织用于 NGS。
• 样本禁忌：严重降解、坏死、脱钙过度的 FFPE 样本。

2. 生物信息学分析（共识 8）

• 覆盖DNA（SNV/InDel/CNV/MSI/TMB）+ RNA（融合 / 剪接），建立标准质控流程。
• 严格变异注释与致病性分级，符合国家临检中心要求。

3. 实验室资质（共识 9）

• 推荐选择CAP/CLIA/CNAS 认证的实验室，每年参加权威机构能力验证。

五、报告解读与临床应用（共识 10）

• 标准报告结构：基本信息→检测结果→变异注释 / 临床解读→质控 / 局限性 / 附录。
• 解读原则：依据国内外共识分级，区分驱动突变、意义未明（VUS）、良性多态。
• MTB 机制：倡导组建分子肿瘤专家委员会（MTB），多学科解读 NGS 结果，制定精准方案。

六、共识要点速览（10 条核心推荐）

1. 常规病理不能明确诊断→推荐 NGS。
2. 常规分子阴性→DNA+RNA 联合 NGS 复检。
3. 结果不一致→第 3 种方法验证。
4. 拟靶向治疗→NGS 验证靶点基因。
5. 进展期→IHC（PD-L1）+NGS（MSI/TMB）指导免疫。
6. 治疗失败→NGS 筛选临床试验。
7. 样本规范：优先组织、避免酸脱钙、肿瘤细胞≥20%。
8. 生信分析：DNA+RNA 联合、标准质控。
9. 实验室：CAP/CLIA/CNAS 认证。
10. 报告解读：组建 MTB，规范分级与临床转化。