胚胎植入前遗传学诊断与筛查（PGD/PGS）实验室技术指南（2018 版）
本指南由中华医学会生殖医学分会制定（2018 年 9 月发布），核心是通过标准化操作与质控，规范 PGD/PGS 实验室全流程，保障检测准确性与胚胎安全性。以下为核心要点与技术规范：
一、实验室基础管理（A 级推荐）
1. 资质与场地
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实验室需设立于省级卫健委批准开展 PGD 技术的医疗机构，具备PCR 实验室资质（含样品处理、试剂配制、扩增、测序、分析等分区）。
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建立SOP 体系，覆盖授精、胚胎培养、活检、遗传检测、冻融、移植全流程，定期更新与自查。
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人员需经专项培训，熟练掌握 ICSI、胚胎活检、单细胞遗传检测等核心操作，严格执行双人核对制度。
2. 核心原则
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严禁无医学指征性别筛查，报告隐藏性别信息。
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建立内部质控 + 外部认证（如 ISO 15189、PGDIS 认证）体系，保障结果可靠性。
二、授精与胚胎培养（A 级推荐）
1. 授精方式
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优先采用ICSI（卵胞浆内单精子注射），彻底清除卵周颗粒细胞，避免父 / 母源遗传物质污染。
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FISH 检测时可选用 IVF，但需严格防控污染。
2. 培养模式
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全程单滴 / 单皿培养，确保胚胎、活检样本、检测结果一一对应，严格标识与洗涤。
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囊胚培养优先，目标囊胚形成率≥55%、顶级囊胚率≥35%。
三、胚胎活检技术（A 级推荐）
1. 活检时机（首选）
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囊胚期滋养层细胞活检（D5–D6，4BB 及以上囊胚），对胚胎发育影响最小、诊断率最高。
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备选：极体活检（仅反映母源信息）、卵裂期活检（D3，6–8 细胞，≤2 个卵裂球）。
2. 操作规范
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透明带打孔：首选激光法（精准、无化学 / 机械损伤），禁用酸性 Tyrode 液。
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细胞获取：A 级囊胚活检 **≥6 个滋养层细胞；非 A 级活检3–6 个 **；远离内细胞团取样。
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环境质控：百级层流、37℃恒温、无菌矿物油覆盖；单胚胎单微滴，杜绝交叉污染。
3. 冻融要求（B 级推荐）
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活检后立即玻璃化冷冻，囊胚解冻存活率≥95%；胚胎编号与样本、报告严格一致。
四、遗传学检测技术（A 级 / B 级推荐）
1. 技术选择（按适应症）
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检测类型 |
适用场景 |
推荐技术 |
核心要求 |
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单基因病 PGD |
地中海贫血、耳聋等 |
PCR + 测序 + 连锁分析（STR/SNP） |
突变位点 + 上下游连锁标记联合检测，降低 ADO（等位基因脱扣） |
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染色体病 PGD |
易位、倒位、非整倍体 |
SNP 芯片、NGS（CNV-seq） |
全染色体覆盖，分辨率≥10Mb |
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PGS（非整倍体筛查） |
高龄、反复流产 / 种植失败 |
NGS、SNP 芯片 |
24 条染色体全面筛查，NGS 测序深度≥8× |
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性别鉴定（医疗指征） |
X 连锁遗传病 |
PCR、FISH |
仅用于医疗目的，报告不显示性别 |
2. 关键质控
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单细胞扩增：设置空白对照（洗涤液、试剂），扩增效率 > 90%，ADO 率 < 10%。
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NGS 检测：基因病测序深度≥100×；CNV 分析一致性 > 99%，嵌合阈值≥30%。
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结果判读：双人独立分析、第三人审核；诊断不明胚胎禁止移植。
五、实验室质量控制（A 级推荐）
1. 核心指标
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活检检出率：≥94%；扩增失败率 < 1.2%。
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误诊率：PCR<0.15%，FISH<0.06%，NGS<0.2%。
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室间质评：每年参加国家级 / 国际 PGD 室间质评（如 CAP、ESHRE）。
2. 流程质控
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样本全程唯一标识，双人核对；实验记录可追溯。
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定期统计活检损伤率、无结果率，用未移植胚胎复核误诊率。
六、报告与临床衔接
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报告包含患者信息、胚胎编号、活检阶段、检测方法、结果、审核者，隐藏性别（医疗指征除外）。
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PGD/PGS 后建议单胚胎移植；嵌合胚胎需遗传咨询后谨慎选择；妊娠后必须行侵入性产前诊断验证。