经血源子宫内膜干细胞资源库建立标准专家共识（2020）核心解读
本共识由河南省细胞生物学会干细胞专业委员会、中国研究型医院学会临床数据与样本资源库专业委员会联合制定，发表于《新乡医学院学报》2020 年 9 月第 37 卷第 9 期，核心目标是规范 MenSCs 采集、制备、存储与管理，保障细胞质量、伦理合规与临床转化安全。
一、共识核心定位与术语规范
1. 核心定位
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以公益捐赠为导向，建立标准化 MenSCs 资源库，为基础研究、产品开发与临床转化提供合规、高质量细胞资源。
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统一命名：经血源子宫内膜干细胞（MenSCs），替代既往 “经血干细胞 / 子宫内膜再生细胞” 等不规范称谓。
2. MenSCs 核心特性（共识明确）
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来源：女性月经血脱落的子宫内膜组织，无创采集、可重复获取。
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生物学特性：高增殖、多向分化、免疫调节、遗传稳定，无伦理争议。
二、资源库建设基本要求
1. 资质与合规（底线）
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必须符合 **《人类遗传资源管理条例》《干细胞临床研究管理办法》** 及 GMP 相关要求。
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需获得人类遗传资源采集 / 保藏许可，在批准范围内开展工作。
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独立法人实体，具备质量管理体系、生物安全体系、伦理审查体系。
2. 场地与设施（核心硬件）
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选址：独立封闭区域，远离污染、振动与辐射，毗邻采集 / 临床单元。
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功能分区（严格物理隔离）：
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洁净区：万级 / 局部百级，用于细胞分离、培养、制备。
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质控区：微生物、细胞活力、表型、遗传检测。
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存储区：-196℃液氮罐分区存储（原代 / 种子 / 工作库）。
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辅助区：样本接收、冷链、档案、办公。
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设备：全自动分离系统、CO₂培养箱、流式细胞仪、深低温冰箱、液氮存储系统、实时监控系统。
3. 人员资质（关键软件）
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核心岗位：库主任、质量受权人、技术负责人、质控负责人，不得兼任。
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人员要求：
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库主任：5 年以上干细胞 / 生物样本库管理经验。
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技术 / 质控：3 年以上相关经验，持证上岗。
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采集人员：医师 / 护士执业证，经培训合格。
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全员：无传染病，每年体检，建立健康档案。
三、MenSCs 采集标准（共识重点）
1. 供者筛选（严格准入）
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纳入标准：18–45 岁健康女性，月经规律，无传染病、自身免疫病、恶性肿瘤、遗传性疾病史。
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排除标准：HIV、HBV、HCV、梅毒阳性；近 3 个月输血 / 免疫抑制剂；妊娠 / 哺乳期；经期感染 / 异常出血。
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筛查流程：知情同意→健康问卷→体格检查→实验室筛查（传染病、肝肾功能、血常规）。
2. 采集流程（标准化）
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时机：月经第 2–4 天，经量较多时采集。
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方式：无菌阴道采集，使用专用 MenSCs 采集器（含抗凝剂），采集量5–20mL。
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标识：唯一编码（ISBT128 兼容），标注供者 ID、采集日期、时间、部位。
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记录：双人复核，全程可追溯。
3. 运输与接收（冷链保障）
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运输：2–8℃冷链，4 小时内送达实验室；超 6 小时拒收。
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接收：核对信息、检查样本状态、记录温度，不合格样本立即隔离并记录。
四、MenSCs 分离、制备与质量控制（核心技术标准）
1. 分离与培养（共识推荐流程）
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分离：密度梯度离心 + 胶原酶消化，去除红细胞与杂质，获取单核细胞。
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培养：无血清 / 低血清培养基，37℃、5% CO₂培养；P0–P3 代为最佳使用代次。
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传代：融合度70%–80%时传代，密度5000–6000 个 /cm²。
2. 质量控制（全流程质控，共识强制）
（1）过程质控
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微生物检测：细菌、真菌、支原体、内毒素，每批次必检。
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细胞活力：台盼蓝拒染法，活率≥90%。
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形态：梭形、成纤维样，无异常形态。
（2）终产品质控（放行标准）
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检测项目 |
合格标准 |
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细胞活率 |
≥90%（冻存前 / 复苏后） |
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表型 |
CD73⁺、CD90⁺、CD105⁺；CD34⁻、CD45⁻、HLA‑DR⁻ |
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分化潜能 |
成骨、成脂、成软骨分化阳性 |
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微生物 |
无菌、无支原体、内毒素 < 0.5EU/mL |
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遗传稳定性 |
染色体核型正常，无致瘤性 |
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回收率 |
复苏后细胞回收率≥70% |
3. 冻存与复苏（标准化）
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冻存：程序降温（1℃/min），冻存液含5%–10%DMSO+ 人血白蛋白 / 自体血清，-196℃液氮存储。
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存储：三级库管理（原代库、种子库、工作库），分区存放，实时监控温度。
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复苏：37℃快速解冻，洗涤后检测活率与质量。
五、伦理与法规（共识红线）
1. 知情同意（核心）
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供者完全知情、自愿、无偿捐赠，签署书面知情同意书（含采集、存储、使用、隐私保护、退出权）。
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明确：不用于商业销售，仅用于科学研究与临床转化。
2. 隐私与数据保护
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供者信息匿名化编码，严格保密，仅限授权人员访问。
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数据存储：电子 + 纸质双备份，符合《个人信息保护法》。
3. 生物安全
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样本处理在 ** 生物安全二级（BSL‑2）** 实验室进行。
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废弃物：高压灭菌后处理，严防污染扩散。
六、资源库管理与质量体系
1. 管理制度（全覆盖）
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标准操作规程（SOP）：采集、分离、培养、质控、冻存、复苏、运输、设备、记录、应急。
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设备管理：定期校准、维护、验证，记录完整。
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物料管理：供应商审计，试剂 / 耗材批批检，合格放行。
2. 记录与追溯（全程可追溯）
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每份样本唯一编码，记录从采集到使用的全流程信息。
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记录保存：至少 30 年，符合法规要求。
3. 质量审计与持续改进
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内部审计：每年至少 1 次。
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外部审计：接受主管部门与行业协会检查。
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偏差处理：建立偏差报告、调查、纠正与预防措施（CAPA）体系。
七、核心推荐要点（临床 / 管理速记）
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供者严格筛选：18–45 岁健康女性，排除传染病与高危疾病，知情同意是前提。
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采集标准化：月经第 2–4 天，无菌采集，2–8℃冷链、4 小时内处理。
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制备质控为王：P0–P3 代，严格执行微生物、表型、活力、遗传质控，** 活率≥90%** 方可放行。
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存储规范：-196℃液氮，三级库管理，实时监控，复苏活率≥70%。
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伦理合规：无偿捐赠、匿名化、隐私保护，严禁商业销售。
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质量体系：SOP 全覆盖、全程记录、定期审计、持续改进。
八、与后续团体标准衔接（2022 年）
本共识为 2022 年中国研究型医院学会发布的 **《经血源子宫内膜干细胞资源储存规范》（T/CRHA 012–013）** 奠定基础，后者进一步细化采集运输、分离制备的技术参数，形成完整标准体系