2020 BSH 指南：止血与血栓形成实验室检验

一、指南核心定位与排除范围

1. 核心定位

• 指导临床实验室开展高质量、标准化的基础止血与血栓检验，服务常规出血 / 血栓倾向筛查与诊断BSH。
• 整合并更新既往 BSH 相关指南，聚焦基础凝血因子、抗凝蛋白、纤溶指标检测。

2. 明确排除内容（由其他 BSH/UKHCDO 指南覆盖）

• 肝素诱导血小板减少症（HIT）、狼疮抗凝物（LA）检测BSH
• D - 二聚体、血小板功能、血管性血友病（VWD）诊断BSH
• 血友病 A/B 因子替代治疗监测、口服抗凝药（VKA/DOAC）监测BSH
• 血栓弹力图（TEG/ROTEM）、凝血酶生成试验等整体止血检测BSH

二、分析前质控（核心要点）

1. 采血要求
   • 清洁静脉穿刺，最小化止血带压迫；成人优先 21G 针头（血管条件好可用 19G）BSH
   • 枸橼酸钠抗凝管（1:9）严格按刻度充满，采集后立即轻柔颠倒混匀 3–6 次，严禁管间转移血液BSH
   • 红细胞压积＞0.55 时，按公式调整枸橼酸钠体积BSH
    
2. 样本质量筛查
   • 所有止血检验样本先做 PT+APTT，验证样本质量、排查未知抗凝药干扰BSH
   • 凝血筛查异常时，加做 TT 排查肝素 / 类肝素物质污染BSH
    
3. 其他关键要求
   • 避免溶血、脂血、黄疸样本；冷藏样本需复温至 37℃再检测BSH
   • 儿童、妊娠、不同血型需建立专属参考区间（如蛋白 S、VWF、D - 二聚体）
    

三、核心检测方法学规范

1. 一期凝固法（OSCA，主流方法）

• 原理：基于待测样本纠正乏因子血浆凝固时间的能力，定量凝血因子活性
• 应用场景
  • PT 法：检测FII、FV、FVII、FX（外源性 / 共同途径）
  • APTT 法：检测FVIII、FIX、FXI、FXII、HMWK、PK（内源性途径），也可测 FII/FV/FX
  • 蛇毒法：用于 FII、FX 罕见变异体检测（常规 OSCA 可能漏检）
   
• 质控要点
  • 至少3 个样本稀释度验证线性与平行性BSH
  • 排除狼疮抗凝物（LA）、直接 Xa/IIa 抑制剂干扰；服用 DOAC 者避免做因子活性检测BSH
  • 校准品 / 质控品溯源至WHO 国际标准（IS），至少 2 水平质控（正常 + 异常）BSH
   

2. 发色底物法（CA，补充方法）

• 主要用于FVIII、FIX、抗凝血酶（AT）、ADAMTS13活性检测，结果更稳定、干扰更少BSH
• 抗凝血酶检测：优先FXa 为底物的肝素辅因子法，不推荐牛凝血酶法（受肝素辅因子 II 干扰）BSH

3. 纤维蛋白原检测（强制推荐）

• 首选 Clauss 法（凝血酶时间法），结果准确、干扰少BSH
• PT 衍生法不推荐临床使用BSH
• 低纤维蛋白原时，加做抗原检测区分低纤维蛋白原血症与异常纤维蛋白原血症BSH

4. 因子 XIII（FXIII）检测

• 禁用凝块溶解试验（仅重度缺乏＜5IU/dl 异常，假阴性高）BSH
• 推荐自动化氨释放法测活性，结合抗原检测分型，必要时行F13A1/F13B基因检测BSH

5. 纤溶指标（α2 - 抗纤溶酶、PAI-1）

• 用发色底物法测活性、ELISA 测抗原，PAI-1 缺乏需基因验证（正常下限近 0，易漏诊）BSH

四、血栓倾向检测（遗传性易栓症）

1. 检测时机与前提

• 急性血栓事件后至少 4–6 周再检测（急性期因子消耗致假阴性）BSH
• 排除抗凝药（VKA/DOAC/ 肝素）干扰；VKA 治疗期间禁做蛋白 C/S 检测BSH
• 先做凝血筛查（PT/APTT/Clauss 纤维蛋白原 / TT），排除基础疾病与药物影响BSH

2. 核心检测项目与规范

1. 抗凝血酶（AT）
   • 发色底物法（FXa 底物）；单次降低需2 次独立样本验证，结合基因检测（SERPINC1）BSH
    
2. 蛋白 C（PC）
   • 发色底物法；VKA 治疗期间结果不可靠，需停药后复测BSH
    
3. 蛋白 S（PS）
   • 优先游离 PS 抗原免疫检测筛查；活性检测仅用于亚型分型（II 型缺乏）BSH
   • 妊娠、口服避孕药、肝病会致 PS 降低，需结合临床解读BSH
    
4. 因子 V Leiden（FVL）与凝血酶原 G20210A
   • FVL：APC 抵抗试验（样本预稀释于乏 FV 血浆）或直接基因检测BSH
   • 凝血酶原 G20210A：直接基因检测，不推荐表型筛查BSH
    
5. ADAMTS13（血栓性血小板减少性紫癜 TTP）
   • chromogenic/fluorogenic ELISA 测活性 + 自身抗体；临床疑诊 TTP 无需等结果即启动治疗BSH
   • 校准品溯源至 WHO 标准，结果需2 次验证BSH
    

五、分析后与结果解读

1. 参考区间与截断值
   • 本地验证试剂 / 仪器组合的专属参考区间；无本地数据时，验证厂商推荐截断值（≥20 例样本）BSH
   • 不同年龄、性别、血型、妊娠状态需分层设定区间
    
2. 结果解读原则
   • 由经验丰富的临床 / 检验人员解读，结合临床病史、用药、样本状态BSH
   • 单次异常需重复检测 + 排除干扰（抗凝药、LA、样本问题），不轻易诊断缺陷BSH
   • 易栓症指标降低需2 次独立样本确认，结合基因检测明确遗传性BSH
    

六、实验室质量保证（强制要求）

• 参加认可的室间质评（EQA），无 EQA 时开展实验室间样本比对与数据共享BSH
• 每批次检测至少2 水平质控（正常 + 异常），记录失控与纠正措施BSH
• 不同试剂批次禁用旧校准曲线，重新定标BSH