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  • micro RNA(miRNA)综述-32017-10-15 08:09:09

    未来要解决的问题 miRNAs在多个物种中广泛被发现,而且在进化上高度保守。这些小玩意儿留给我们一大堆谜团:miRNA的确切功能是什么?它的目标靶是什么?作用机制是什么?也许需要对植物或者线虫的基因组进行miRNAs突变株的筛选,在果蝇中可以用targeted- disr...

  • micro RNA(miRNA)综述-22017-10-15 08:08:24

    miRNA的作用方式 最早被发现的两个miRNAs――lin-4 and let-7被认为是通过不完全互补结合到目标靶mRNA3非编码区端,以一种未知方式诱发蛋白质翻译抑制,进而抑制蛋白质合成,阻断mRNA的翻译。多个果蝇miRNAs也被发现和他们的目标靶mRNAs的3非编码区有部分同源...

  • micro RNA(miRNA)综述-12017-10-15 08:07:38

    RNA一度被认为仅仅是DNA和蛋白质之间的过渡,但越来越多的证据清楚的表明,RNA在生命的进程中扮演的角色远比RNA我们早前设想的更为重要。RNA干扰(RNA interference)的发现使得人们对RNA调控基因表达的功能有了全新的认识,更因为可以简化替代基因敲除而成为...

  • siRNA个人经验小结2017-10-15 08:06:49

    在活体RNAi关键点:类似药物属性的引入,如稳定性、细胞内的传送、组织的生物可溶性进入合成的siRNA。 授予siRNA类似药物的属性 化学稳定性的胆固醇共聚的siRNA 显著的改善了其在体内和体外的药物属性。 化学稳定性增强的方法:对正义和反义链进行部分的phosp...

  • RNA的琼脂糖凝胶电泳实验原理和步骤2017-10-15 08:06:05

    实验目的 掌握植物总RNA非变性胶电泳的原理和方法。 二、实验原理 RNA电泳可以在变性及非变性两种条件下进行。非变性电泳使用1.0%--1.4%的凝胶,不同的RNA条带也能分开,但无法判断其分子量。只有在完全变性的条件下,RNA的泳动率才与分子量的对数呈线性关系...

  • 琼脂糖凝胶电泳检测RNA质量2017-10-15 08:05:20

    一.原理 带电荷的物质在电场中的趋向运动称为电泳。其中,凝胶电泳由于其操作简便、快速、灵敏等优点,使它成为分离、鉴定和提纯核酸的首选标准方法。与蛋白质分子类似,核酸分子也是两性解离分子。在pH3.5时,碱基上的氨基基团解离,而三个磷酸基团中只有第...

  • RNA甲醛变性电泳实验原理和操作2017-10-15 08:04:36

    [原理] 用溴化乙锭等荧光染料示踪的核酸电泳结果可用于判定核酸的纯度。由于DNA分子较RNA分子大许多,电泳迁移率低;而RNA中以rRNA最多,占到80%~85%,tRNA及核内小分子RNA占15%~20%,mRNA占1%~5%。故总RNA电泳后可呈现特征性的三条带。在原核生物为明显可见...

  • RNA的电泳,转膜和杂交2017-10-15 08:03:48

    实验原理: 基本同 Southern Blotting,但因RNA 是单链分子,必须消除局部区域形成的二级结构,在电场中泳动的距离才能反映它本身的大小,因而需使用变性胶进行电泳;另应特别注意防止RNA 的降解。 实验材料: 经检测质量好的 RNA 实验步骤: 1.制胶: Agaro...

  • RNA的变性琼脂糖凝胶电泳实验原理、材料和操作步骤2017-10-15 08:03:04

    一、实验目的 学习RNA琼脂糖凝胶电泳的使用技术。 二、实验原理 RNA可以使用非变性或变性凝胶电泳进行检测。在非变性电泳中,可以分离混合物中不同分子量的RNA分子,凡是无法确定分子量。只有在变性情况下,RNA分子完全伸展,其泳动率才与分子量成正比。 判断...

  • RNA琼脂糖变性胶电泳分析2017-10-15 08:02:20

    一、原理 RNA分子是以单链形式存在的,但在局部仍有双链结构形成。由于这种局部双链结构的干扰,使得在非变性凝胶上对RNA分子完整性的鉴定及其分子量大小的检测,变得不十分可靠。通过加入乙二醛一二甲基亚砜、氢氧化甲基汞、甲醛等变性剂进行变性处理,使其...

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