用于免疫测定方法建立的抗原 在目前通常所用的免疫测定试剂盒中所用的抗原一般有三大类，即纯化抗原、合成抗原和基因工程抗原。 纯化抗原系指从人体液、组织或病原体培养物中采用物理化学方法如超速离心、过滤层析、电泳分离等所分离得到的目的抗原，如从HAg...

全自动酶免疫分析仪的基本原理和测定模式 目前绝大部分全自动免疫分析仪所采用的测定原理是酶免疫试验，这些分析仪又可称为全自动酶免疫分析仪，这一类分析仪根据其所用试剂是否为专用，又可分为试剂限定和试剂开放两类，试剂开放的全自动酶免疫分析仪相对较...

ELISA测定的常用模式--固相捕获法测IgM抗体 在病原体急性感染的诊断中，通常需检测IgM抗体，如急性甲型肝炎诊断的血清抗HAVIgM检测、急性乙型肝炎病毒感染的血清抗HBc lgM检测和TORCH项目的系列IgM检测等。IgM抗体也有使用间接法测定的，如目前在市场上可见到...

ELISA测定的常用模式--竞争法测抗体 抗体的测定一般不使用竞争法。当抗原中杂质难以去除或抗原的结合特异性不稳定时，可采用这种模式测定抗体。如乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)和乙型肝炎病毒e抗体(HBeAb)的测定，由于e抗原较核心抗原仅多29个氨基酸，e抗原很...

ELISA测定的常用模式--双抗原夹心法测抗体 间接法测抗体实际上测定的只有IgG类，而双抗原夹心法所测定的抗体则为所有各类，且不受非特异IgG的干扰，因此，双抗原夹心法测抗体的灵敏度和特异性要高于间接法。目前，为提高抗体测定的灵敏度，国内的间接法ELISA...

ELISA测定的常用模式--间接法测抗体 基本方法的操作如下: 1．将病原体的抗原在碳酸盐缓冲液中4~C过夜包被，形成固相抗原，洗涤去除未与固相结合或结合不紧的抗原后，用小牛血清或牛血清白蛋白等封闭，洗涤去除未结合的部分及杂质。 2．加入含待测抗体的临床样...

大分子抗原因其具有两个以上的抗原决定簇，而可用双抗体夹心法测定，小分子半抗原如地高辛、茶碱等药物以及T3，T4及睾酮等激素因其只有一个抗原决定簇，从而无法使用双抗夹心方法测定，只能采用竞争抑制法测定。具体步骤如下： 1．先用抗小分子的特异抗体如双...

临床ELISA测定的常用模式--双抗体夹心法测抗原 对于含多个抗原决定簇的大分子蛋白，使用双抗体夹心ELISA模式测定相当简便，现有的商品试剂盒基本上都采用此种测定模式。具体测定方法如下： 1．首先以双抗体之一于碳酸盐缓冲液中4℃下过夜包被聚苯乙烯等固相，...

一、ELISA的基本原理 酶联免疫吸附试验(ELISA)顾名思义就是以酶作为标记指示物、以抗原抗体免疫反应为 基础的固相吸附测定方法。因此，一个ELISA测定试剂，其有机组成部分包括三个方面，即固相支持物及包被的抗原或抗体、酶标记的抗体或抗原和酶反应底物等。...

酶免疫试验的优点及局限性 酶免疫试验之所以能成为临床免疫检验中的主导技术，是与它的方法上的特异性和灵敏性、操作上的简便性以及试剂的稳定性分不开的，还有很重要的一点是，其对环境没有污染威胁。 尽管如此，作为一项免疫检验技术，酶免疫试验还是有其局...