（1）包埋剂的配制：商品提供的Lowicrys包埋剂由三个部分组成：单体（Monomer），交联剂（Crosslinker）和引发剂（Initator）。调整单体和交联剂的比例，增加交联剂的量，组织块的硬度增加。中等硬度的组织块，其配制比例如下： K4M：单体 17.30g 交联剂 2.70...

免疫细胞化学技术为在细胞水平上研究免疫反应做出了贡献，但由于光学分辨率的限制，不可能从细胞超微结构水平观察和研究免疫反应。因此，Singer于1959年首先提出用电子密度较高的物质铁蛋白（ferritin）标记抗体的方法，为在细胞超微结构水平研究抗原抗体反应...

免疫电镜技术与光镜免疫细胞化学染色方法的基本原理和试剂准备基本相同，相关内容可参考本书第四章，这里仅介绍免疫电镜的几种染色方法，包括包埋前染色、包埋后染色和冰冻超薄切片免疫染色三种。 1．包埋前染色 包埋前染色即在进行常规电镜包埋处理前先行免...

1、 包埋后染色 (超薄切片的金标记法) （1）超薄切片厚50～70nm左右，载于200～300网孔的镍网上； （2）滴1%的H2O2液1滴于蜡板上，将网的载片面轻浮于液滴上10min至1h； （3）双蒸水洗3次，每次10分钟。第1、2次洗法如（2），浮于液面上，第3次以盛双蒸水的注...

在免疫组化过程中，为了更好的说明问题和查找原因，最好设置阳性对照片（已知的高表达相应抗原的组织）和阴性对照组织片（不加一抗但是加二抗系统/不加任何 抗体两组），所有操作过程应完全一致。 染色弱或者没有染色 （按照先后顺序，先排除一些简单的原因...

一、固定剂 1、4%多聚甲醛-0.1mol/L磷酸缓冲液（pH7.3） 2、4%多聚甲醛-磷酸二氢钠/氢氧化钠 3、Bouins液及改良Bouins液 4、Zambonis（Stefaninis）液 5、PLP液 6、Karnovskys液（pH7.3） 7、0.4% 对苯醌 （Parabenzoquinone） 8、PFG液（Parabenzoquinone-F...

载玻片/盖玻片处理 聚醚酰亚胺或多聚赖氨酸在室温下包被盖玻片1小时。 无菌水冲洗盖玻片（3次 ，每次5分钟）。 可将盖玻片干完全干燥，并在紫外光下消毒至少4小时。 在玻片上种植细胞，或准备细胞离心涂片器，或做好涂抹准备。 磷酸盐缓冲液（ PBS ）进行简短...

四 结果分析 编号 阳性片 待检片 阴性对照 结论 1 - - - 操作错误，抗体失效 2 + + + 非特异性着色 3 - + - 阳性片不含靶抗原 4 + - - 待检片不含定位抗原 5 + + - 待检片含定位抗原 染色结果的判断除了上述之外，还可以从以下方面加以判断： （1） 阳性反应...

一 基本原理 免疫组织/细胞化学是利用抗原抗体具有高度特异性结合反应的原理，采用已知抗体检测组织或细胞的抗原物质，然后以适当的方式显示其结合信号以证明组织或细胞是否存在未知抗原，并进行定性、定位或定量的研究。 二 基本步骤 1 三步法：以SP（链霉卵...

1、洗载玻片 将载玻片置于重铬酸钾和浓H2SO4混合液中，目的是为了是载玻片上的硅胶等除去，同时使一些肉眼看不见的凹凸不平的表面变平整，便于组织吸附，然后置于清水中清洗，除去残余的重铬酸钾和浓H2SO4（大约冲一个小时左右），再将载玻片浸泡于酒精之中，...