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  • RNAi技术专有名词(2)2017-10-14 13:48:43

    21.Homologous Chromosome:同源染色体一对染色体,分别来自父本和母本,染色体上有着相同的线性基因序列。 22.Recombinant Clone:重组克隆将不同来源的DNA片段合成在一个DNA分子中,这种技术称为重组,得到的分子为重组克...

  • RNAi的发现和起源2017-10-14 10:52:36

    首次发现dsRNA能够导致基因沉默的线索来源于线虫Caenorhabditis elegans的研究。 lang=EN-US1995年,康乃尔大学的Su Guo博士和 lang=EN-USKemphues在试图阻断秀丽新小杆线虫(C. elegans)中的par-1基因时,发现了一个意想不到的现象。她们本是利用反义RNA技...

  • RNAi产生的基因沉默与生物学功能2017-10-14 10:51:55

    RNAi所产生的基因沉默具有如下特点: 1)高效性。 Elbashir等在研究中发现分别为25 nmol/L与100 nmol/L的起始双链RNA产生的结果是一样的,只是高浓度起始的更有效些。将双链RNA浓度降低到1.5 nmol/L时产生的基因沉默效果变化不大,只有当浓度降低到0.05 nmol/L...

  • RNAi-制备小分子干扰RNA(small interfering RNAs,siRNAs)的方2017-10-14 10:51:16

    越来越多的研究人员开始采用小分子干扰RNA(small interfering RNAs,siRNAs)来抑制特定的哺乳动物基因表达。siRNA是一种短片断双链RNA分子,能够以同源互补序列的mRNA为靶目标降解特定的 mRNA,这个过程就是RNA干扰途径(RNA interference pathway)。RNAi的...

  • RNAi-制备小分子干扰RNA(small interfering RNAs,siRNAs)的方2017-10-14 10:50:35

    最适用于:快速而经济地研究某个基因功能缺失的表型 不适用于:长时间的研究项目,或者是需要一个特定的siRNA进行研究,特别是基因治疗 体内表达 前面的3种方法主要都是体外制备siRNAs,并且需要专门的RNA转染试剂将siRNAs转到细胞内。而采用siRNA表达载体和...

  • RNA干扰技术(RNA interference,RNAi)2017-10-14 10:49:55

    1995年,康乃尔大学的Su Guo博士在试图阻断秀丽新小杆线虫(C. elegans)中的par-1基因时,发现了一个意想不到的现象。她们本是利用反义RNA技术特异性地阻断上述基因的表达,而同时在对照实验中给线虫注射正义RNA(sense RNA)以期观察到基因表达的增强。但得...

  • RNAi的应用(研究基因功能、信号传导通路和基因治疗)2017-10-14 10:49:15

    1. 研究基因功能的新工具 已有研究表明RNAi能够在哺乳动物中灭活或降低特异性基因的表达,制作多种表型,而且抑制基因表达的时间可以随意控制在发育的任何阶段,产生类似基因敲除的效应。线虫和果蝇的全部基因组序列已测试完毕,发现大量未知功能的新基因,RN...

  • RNAi的作用机制(起始阶段和效应阶段)2017-10-14 10:48:37

    现有的RNAi作用机制模型包括起始阶段和效应阶段: 1)起始阶段:dsRNA进入细胞的方式可以是外源导入或者转基因、病毒感染等。引入的dsRNA被核酸酶RNaseⅢ家族中特异识别dsRNA的Dicer酶,以一种ATP依赖的方式逐步切割成长约 21-23nt的由正反义链组成的双链小分子...

  • RNAi的功能2017-10-14 10:47:56

    1.高通量的研究基因功能 在后基因组时代,需要大规模高通量的研究基因的功能,由于 RNAi能高效特异的阻断基因的表达,因而RNAi成为研究基因功能的很好的工具。研究者将线虫三号染色体上2232个基因对应的dsRNA合成出来,并注射到线虫性腺内,然后观察子代细胞...

  • RNAi放大效应机制2017-10-14 10:47:19

    由于在一些生物中RNAi的影响格外显著,有人提出在RNAi 途径中可能存在某个(信号)扩增的步骤。这种扩增可能是复制外源注入的dsRNA从而产生更多的siRNA ,也可能是直接扩增siRNA本身。这种扩增可能在RNA诱导沉默复合物(RISC)形成过程进行,作为RISC形成的补...

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