实验十 植物细胞的微核检测技术 一、原理: 微核(micronuclei)简称MCN,是真核类生物细胞中的一种异常结构,往往是细胞经辐射或化学药物的作用而产生的。在细胞间期,微核呈圆形或椭圆形,游离于主核之外,大小应有主核1/3以下。微核的折光率及细胞化学反应性...
一、仪器设备: 1.塑料管柱(Bio-Rad Econo-Pac column 732-1010, 1.512 cm) 2.分划收集器(fraction collector, 另需准备干净试管约60 支) 3.浓缩用离心机(低速5,000 rpm)及浓缩离心管Centriplus 二、药品试剂: 1.DEAE Sephacel (胶体体积约15 mL,预...
若表现蛋白质上含有一段六个His 的片段,而亲和吸着剂胶体上接有镍离子,此蛋白质会专一性地结合到吸着胶体;洗去杂质后可用imidazole 溶离纯质蛋白质(Pharmacia 操作手册, Affinity Chromatography)。 一、仪器设备: 1.亲和层析管柱 (Bio-Rad 731-1550...
一、仪器设备: 1.色析管柱(Pharmacia C column, 1.6100 cm)、铁架、铁夹及水平仪; 2.分划收集器(fraction collector, 需准备干净试管约100 支); 3.浓缩用离心机(低速5,000 rpm); 4.浓缩用离心管Centriprep-30 (Amicon 4322)。 二、药品试剂: 1....
包涵体是外源基因在原核细胞中表达时,尤其在大肠杆菌中高效表达时,形成的由膜包裹的高密度、不溶性蛋白质颗粒,在显微镜下观察时为高折射区,与胞质中其他成分有明显区别。包涵体形成是比较复杂的,与胞质内蛋白质生成速率有关,新生成的多肽浓度较高,无充...
(5)20%磺基水杨酸溶液 (6)奈氏(Nessler)试剂应用液 贮存液;称取碘化钾(KI)7.58g于250ml三角烧瓶中,用蒸馏水5ml溶解,再加入碘(I2) 5.5g溶解,加7~7.5gHg用力振摇10min(此时产生高热,须冷却),直至棕红色的碘转变成带绿色的碘化汞钾液为止,过滤上清...
目的要求 1.了解蛋白质分离提纯的总体思路。 2.掌握盐析法、分子筛层析法、离子交换层析等实验原理及操作技术。 实验原理 血清中蛋白质按电泳法一般可分为五类:清蛋白、1-球蛋白、2-球蛋白、-球蛋白和-球蛋白,其中-球蛋白含量约占16%,100ml血清中约含1....
(9)0.8 mol/L pH9.0硼酸缓冲液:取20ml 0.8 mol/L硼酸溶液,加80ml 0.2 mol/L四硼酸钠溶液,混合后,用pH计检查校正。 (10)0.4 mol/L pH9.0硼酸缓冲液(用0.8 mol/L稀释1倍即可); (11)0.2 mol/L pH8.0硼酸缓冲液:取70ml 0.2 mol/L硼酸溶液,加30ml 0...
目的要求 1.学习胰蛋白酶的纯化及其结晶的基本方法。 2.了解酶的活性与比活性的概念。 实验原理 胰蛋白酶是以无活性的酶原形式存在于动物胰脏中,在Ca2+的存在下,被肠激酶或有活性的胰蛋白酶自身激活,从肽链N端赖氨酸和异亮氨酸残基之间的肽键断开,失去...
原理 盘状聚丙烯酰胺凝胶,是由丙烯酰胺单体和少量的交联剂甲叉双丙烯酰胺,在催化剂的作用下聚合交联而成的三维网状结构的凝胶。 改变单体的浓度或单体与交联剂的比例,可以得到不同孔径的凝胶,将次凝胶灌装于直立的玻璃管中,再加样品,进行电泳分离,称为...