蛋白质的提取工作是将经过处理或破碎的细胞，置于一定的条件和溶液中，让被提取物充分释放出来的过程。影响提取的因素主要是被提取物质在提取的溶液中溶解度的大小及由固相扩散到液相的难易程度。某一物质在溶剂中溶解度大小与该物质的分子结构及溶剂理化性质...

一、实验目的和内容 目的：1. 通过本次实验的学习与操作，使学生在实验过程更好的理解SDS-聚丙烯酰胺凝胶（PAGE）测定蛋白质纯度与分子量的原理与依据； 2. 要求学生掌握电泳原理以及SDS－PAGE垂直板电泳分离蛋白质技术； 3. 熟悉垂直板电泳操作原理和方法，...

一、实验目的和原理 目的：学会交联法制备固定化酶的操作技术 内容：制备固定化酶的方法很多，利用双功能试剂或多功能试剂在酶分子间，酶分子与惰性蛋白间，或酶分子与载体间进行交联反应，以共价键制备固定化酶的方法称为交联法，本实验即采用这种方法。交联...

一、实验目的 通过发酵液中凝乳酶的提取纯化，了解酶提取纯化的方法，学习凝胶层析法的工作原理和基本操作技术。 二、实验原理 凝乳酶是一种酸性蛋白酶，其主要的生物学功能是有限剪切Phe105- Met106连接的-酪蛋白，导致牛奶凝结，从而被广泛应用干酪生产中。...

同时，为了监测分离纯化的效果，我们必须对相应的结果进行检测。对于酶而言，主要通过其催化特异的反应进行监测。溶菌酶对革兰氏阳性菌的细胞壁有明显的破坏作用，可利用这一特性进行溶菌酶活性的监测，以便我们区分在纯化过程中，含有溶菌酶的组分。 类似的...

2．加样蛋白浓度低于20 mg/mL，上样体积小于柱体积的1/3。 3. 在整个实验过程中，流速必须得到一定的控制。过大，会使填料压缩紧密，导致流速过低，层析柱有可能堵塞而实验失败，流速过小，实验时间过长，引起酶的活性变化。对于CM Sepharose FF填料，最适流...

一、实验目的和内容 目的：1. 通过本次实验的学习和操作，要求学生掌握离子层析的原理以及离子交换层析的操作方法； 2. 掌握离子交换树脂的再生和保存； 3．掌握比色法测定溶菌酶的酶活。 内容：采用离子交换层析对实验二获得的初提液，进行进一步的分离纯化...

当A量程开关选定在0-1.0A档时，此时数显板上显示和读数即为光吸收A的实际读数，如显示为080即表示为0.80A。 当A量程开关切换在其它量程位置时，则数显光吸收A读数为: A量程选定在0-2.0档时，数显读数2=实际光吸收读数A A量程选定在0-1.0档肘，数显读数1=实际...

一、实验目的和内容 目的：1. 掌握凝胶过滤层析的原理，掌握凝胶柱柱效测定方法； 2. 熟悉凝胶层析的一般过程； 3. 了解凝胶介质的选择原则和应用领域。 内容：1. Sephadex G-50凝胶柱的装填； 2. 凝胶柱柱效测定； 3．凝胶再生的方法。 二、实验仪器和试剂 1...

一、实验目的与内容 目的：1. 掌握等电点沉淀法进行初级分离的操作方法和注意事项； 2. 掌握测定蛋白质标准曲线的制作方法； 3. 能针对不同的目标产物选择恰当的初级分离方法，锻炼应用生物分离技术知识分析、解决实际问题的能力。 内容：1. 从鸡蛋清中粗提取...