实验原理 胞浆内存在糖原或多糖类物质(如粘多糖、粘蛋白、糖蛋白、糖脂等)中的乙二醇基(CHOH-CHOH)经过碘酸(periodicacid)氧 化,转变为二醛基(CHO-CHO),与雪夫(Schiff)试剂中的无色品红结合,形成紫红色染料而沉积于细胞内多糖所在处。该反应称为过...
原理 酶具有高度专一性,一种酶只能催化一种或一类底物发生反应,如淀粉酶只能水解淀粉,不能水解蔗糖。当淀粉被淀粉酶彻底水解为还原性麦芽糖和葡萄糖时,能使班氏试剂的Cu2+还原成Cu1+,生成砖红色Cu2O沉淀。淀粉酶的活性受温度、pH、激动剂及抑制剂、酶浓...
原理 淀粉被淀粉水解,切断淀粉链的-1,4糖苷键,对碘呈蓝紫色的反应消失,这种呈色消逝的速度可以表示水解的程度,因而能衡量酶的活力。 操作方法 1、取试管1支,加20毫升2%淀粉,混匀,在30℃水浴中,使管内温度达到30℃。 2、将淀粉酶0.5ml加到30℃的淀粉...
原理 乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)普遍存在于全身各组织细胞,尤以肌肉细胞为甚。在有辅酶Ⅰ存在时,乳酸脱氢酶可使乳酸脱氢转变成丙酮酸,其氢可经由辅酶Ⅰ、黄素酶传递给甲烯蓝,使之转变为甲烯白。由此产生的颜色变化即可认证乳酸脱氢酶的上...
实验原理 酶的专一性是指一种酶只能对一种底物或一类底物(此类底物在结构上通常具有相同的化学键)起催化作用,对其他底物无催化反应。如淀粉酶只能催化淀粉水解,对蔗糖的水解并无催化作用。淀粉水解产物为葡萄糖,蔗糖水解产物为果糖及葡萄糖,这两种己糖...
实验原理 酶作为生物催化剂与一般催化剂一样呈现温度效应,酶促反应开始时,反应速度随温度升高增快。达到最大反应速度时的温度称为某种酶的最适温度。由于绝大多数酶是有活性的蛋白质,当达到最适温度后,继续升高温度,引起蛋白质变性,酶促反应速度反而逐...
实验原理 酶促反应速度与底物浓度的关系可用米氏方程来表示: 式中,v──反应初速度(微摩尔浓度变化/min); V──最大反应速度(微摩尔浓度变化/min); [S]──底物浓度(mol/L); Km──米氏常数(mol/L)。 这个方程表明当已知Km及V时,酶反应速度与...
实验原理 胰蛋白酶是以无活性的酶原形式存在于动物胰脏中,在Ca2+的存在下,被肠激酶或有活性的胰蛋白酶自身激活,从肽链N端赖氨酸和异亮氨酸残基之间的肽键断开,失去一段六肽,分子构象发生一定改变后转变为有活性的胰蛋白酶。 胰蛋白酶原的分子量约为24000...
实验原理 乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase简称LDH,EC.1.1.1.27, L-乳酸:NAD+氧化还原酶)广泛存在于生物细胞内,是糖代谢酵解途径的关键酶之一,可催化下列可逆反应。 LDH可溶于水或稀盐溶液。组织中LDH含量测定方法很多,其中紫外分光光度法更为简单、...
实验原理 很多植物受到机械损伤时在空气中会逐渐变成褐色,这是损伤时植物细胞破碎,原来彼此分开的多酚氧化酶和多酚类物质接触反应的结果。反应如下: +H2O 多酚氧化酶 +1/2O2 多酚氧化酶(po1yphenoloxidase,PP0)是一种含铜酶,它能够催化酚类物质转变成...