方案一 连续蔗糖梯度:日立CPMX或WX系列离心机,P40ST转头13PET管或13PA管。 单管配置: 1)13PET管:20%-50%(W/W)连续蔗糖梯度。 用0.01M Tris-Hcl配置蔗糖梯度:用20%,25%,30%,35%,40%,45%,50%(W/W)蔗糖液各1.5ml,从离心管低部逐层向上铺设(底...
所分离的颗粒大小和密度相差较大:常速、高速离心;若从样品液中分离2种以上大小和密度不同的颗粒:差速离心;超速离心:差速离心法和密度梯度离心法,后者又分速率区带离心和等密度离心。 1、 差速离心 采用不同离心速度与时间,使不同沉降速度的颗粒分批分离;...
在分离分析特别是蛋白质分离分析中,层析是相当重要、且相当常见的一种技术,其原理较为复杂,对人员的要求相对较高,这里只能做一个相对简单的介绍。 一、 吸附层析 1、 吸附柱层析 吸附柱层析是以固体吸附剂为固定相,以有机溶剂或缓冲液为流动相构成柱的一...
一、凝胶过滤色谱: 一般来说,凝胶过滤色谱的结果好坏直接取决于凝胶柱的柱效(每米多少理论塔板数),而影响柱效的因素主要有: 1、凝胶本身性质: 每一种凝胶均有其合适的分离范围,应选择合适的凝胶进行分离。同样分离范围的凝胶颗粒越细的,柱效越高。 2...
离心是蛋白质、酶、核酸及细胞亚组分分离的最常用的方法之一,也是生化实验室中常用的分离、纯化或澄清的方法。尤其是超速冷冻离心已经成为研究生物大分子实验室中的常用技术方法。 离心机(centrifuge)是实施离心技术的装置。离心机的种类很多,按照使用目的...
离心机类型 通常所使用的离心机根据转子转速大小的不同可分为普通离心机、高速离心机和超速离心机三类。 (1)普通离心机 一般来说,最大转速不超过6000r/min 者属普通离心机;如国产的801型,LXJⅡ型等。离心机转速与相对离心力的测算,如图237。 普通离心机转...
最大速度方法 (1)移动界面超速离心法 含几个组分的样品在足够高的离心场中离心时,每种颗粒都达到其最大沉降速度,这时样品开始分离。离心管的上层逐渐形成透明的上清液,并形成对应于样品各组分的一系列浓度界面,界面的移动相对于每种组分来说是特征的。 虽...
原理 根据-氧化学说,机体组织能将脂肪酸氧化生成乙酰辅酶A。两分子乙酰辅酶A可再缩合成乙酰乙酸。在肝脏内,乙酰乙酸可脱羧生成丙酮,也可还原生成-羟丁酸。乙酸乙酸、-羟丁酸和丙酮总称为酮体。酮体为机体代谢的中间产物。在正常情况下,其产量甚微;患糖尿...
实验原理 粗脂肪是指包括脂肪、游离脂酸、腊、磷脂、固醇及色素等脂溶性物质的总称。这类物质一般溶于乙醚、石油醚、苯及氯仿等,不溶于水或微溶于水。索氏提取器由提取瓶、提取管、冷凝器三部分组成的。提取时,将待测样品包在脱脂滤纸内,放入提取管内。提...
实验原理 血清胆固醇(chol)测定是动脉粥样硬化性疾病防治、临床诊断和营养研究的重要指标。正常人血清胆固醇含量范围 100 ~ 250mg/mL。胆固醇是环戊烷多氢菲的衍生物,它不仅参与血浆蛋白的组成,而且也是细胞的必要结构成分,还可以转化成胆汁酸盐、肾上腺皮...