实验原理
在受检血浆中加入足量的凝血活酶和钙离子,测定血浆凝固所需的时间,即为血浆凝血酶原时间(PT)。本试验是外源性凝血系统凝固的筛检试验。
三、实验方法
材料:
1.水浴箱、灭菌注射器、硅化试管或塑料试管、离心机、秒表。
2.25mmol/L氯化钙凝血活酶试剂。
3.正常人冻干混合血浆。
4.109mmol/L枸橼酸钠溶液。
方法:
1.硅化试管或塑料试管中加入109mmol/L枸橼酸钠溶液0.2ml,静脉采血1.8ml加入上述试管中。充分混匀,3000rpm离心10min,分离血浆。
2.将氯化钙凝血活酶溶液、健康人混合冻干血浆和待测血浆,置37℃水浴中预温5min。
3.取试管1支,加入健康人混合冻干血浆0.1ml,37℃水浴中预温30s,再加入预温的25mmol/L氯化钙凝血活酶溶液0.2ml,混匀,开动秒表计时。
4.不断地倾斜试管至液体流动缓慢趋于停止时,终止计时,记录所需时间。重复测定2~3次,取其平均值。
5.同样方法测定待测血浆的凝血酶原时间(重复测定2~3次,取平均值)。
四、实验结果计算
11~13s(超过正常对照3s有意义)
五、注意事项
1.使用对凝血因子无激活作用的塑料制品或硅化的玻璃器皿采血。
2.采血要顺利,抗凝要充分,采血后仔细检查标本有无溶血、黄疸和凝血块,任何微小的凝块都会影响测定结果,必须重新采血。
3.采血后宜在1h内完成测定,4℃冰箱内保存不应超过4h。
4.水浴温度控制在(37.0±0.5)℃,温度过高或过低都可影响测定结果。