二、半自动脱水机
半自动脱水机日常工作程序可参考全手工脱水日常工作程序进行。梯度乙醇的脱水时间加长。注意事项同手工脱水。
三、全自动密闭式脱水机
全自动密闭式脱水机有控制面板、处理槽、石蜡箱和试剂柜四个部分。为保证组织处理无刺激味道,全自动密闭式脱水机还设有活性炭过滤器。
(1)控制面板有显示屏和小键盘,可由此输入20个不同的处理程序,可设置处理时间和温度,可启动P/V循环(压力和真空交替)和混合循环,出现故障时有报警提示。
(2)处理槽是组织块进行处理的容器。
(3)石蜡箱可将熔化的石蜡保持在设定的温度待用。
(4)试剂柜装有处理试剂。
1.日常工作程序见表5.2。
表5.2 全自动密闭式脱水机脱水日常工作程序
溶液 |
百分浓度 (%) |
时间设定 |
温度 (℃) |
P/V循环(压力和真空交替) |
混合循环 |
中性缓冲甲醛液 |
4 |
2.00h |
35 |
+ |
+ |
乙醇 |
80 |
1.00h |
|
- |
- |
乙醇 |
95 |
1.00h |
|
- |
- |
乙醇 |
95 |
1.00h |
|
+ |
+ |
乙醇 |
95 |
1.00h |
|
+ |
+ |
乙醇 |
100 |
1.00h |
|
- |
- |
乙醇 |
100 |
1.00h |
|
+ |
+ |
乙醇 |
100 |
1.00h |
|
+ |
+ |
二甲苯 |
100 |
0.50h |
|
- |
- |
二甲苯 |
100 |
1.00h |
|
+ |
+ |
石蜡 |
|
1.00h |
60 |
- |
— |
石蜡 |
|
1.00h |
60 |
+ |
+ |
石蜡 |
|
1.00h |
60 |
+ |
+ |
石蜡 |
|
1.00h |
60 |
+ |
+ |
注:截止时间为1/8:00 am
2.双休日工作程序:脱水程序及各试剂的所用时间及功能相同,只将截止时间调至3/8:00 am即可。
3.外检小标本工作程序见表5.3。
表5.3全自动密闭式脱水机外检小标本工作程序
试剂 |
百分浓度(%) |
时间设定 |
温度(℃) |
P/V循环(压力和真空交替) |
混合循环 |
中性甲醛 |
4 |
2.00h |
35 |
+ |
+ |
乙醇 |
80 |
1.00h |
|
- |
- |
乙醇 |
95 |
1.00h |
|
- |
- |
乙醇 |
95 |
1.00h |
|
- |
- |
乙醇 |
95 |
1.00h |
|
+ |
+ |
乙醇 |
100 |
30min |
|
- |
- |
乙醇 |
100 |
30min |
|
- |
- |
乙醇 |
100 |
30min |
|
+ |
+ |
二甲苯 |
100 |
20min |
|
- |
- |
二甲苯 |
100 |
20min |
|
+ |
+ |
石蜡 |
|
30min |
60 |
- |
— |
石蜡 |
|
30min |
60 |
- |
- |
石蜡 |
|
1.00h |
60 |
+ |
+ |
石蜡 |
|
1.00h |
60 |
+ |
+ |
注:截止时间为1/8:00am
4.小动物组织工作程序见表5.4。
表5.4全自动密闭式脱水机小动物组织工作程序
溶液 |
百分浓度(%) |
时间设定 |
温度(℃) |
P/V循环(压力和真空交替) |
混合循环 |
中性甲醛 |
4 |
2.00h |
35 |
+ |
+ |
乙醇 |
80 |
0.50h |
|
- |
- |
乙醇 |
95 |
0.50h |
|
- |
- |
乙醇 |
95 |
0.50h |
|
+ |
+ |
乙醇 |
95 |
0.50h |
|
+ |
+ |
乙醇 |
100 |
0.50h |
|
- |
- |
乙醇 |
100 |
0.50h |
|
- |
- |
乙醇 |
100 |
1.00h |
|
+ |
+ |
二甲苯 |
100 |
20min |
|
- |
- |
二甲苯 |
100 |
20min |
|
+ |
+ |
石蜡 |
|
0.50h |
60 |
- |
— |
石蜡 |
|
0.50h |
60 |
+ |
+ |
石蜡 |
|
1.00h |
60 |
- |
- |
石蜡 |
|
1.00h |
60 |
+ |
+ |
5.大动物组织(如狗、兔、猴):可以同外检组织使用一个程序。
6.脱水程序运行完毕后处理。
-
(1)先按泵出按钮将石蜡抽回缸内,再打开处理槽将组织块取出。
(2)将处理槽内及槽盖上的余蜡擦净。
(3)将底部中央过滤器螺丝拧开,将管道口的蜡擦净,拧紧螺丝。
(4)盖上盖后,按清洗按钮清洗。
7.全自动密闭式脱水机的注意事项。
(1)固定液每三天更换一次,组织块为600~800块。组织固定的好坏直接影响切片质量。为达到组织固定彻底的目的,可使用脱水机的P/V循环和混合循环功能,也可将温度定在38~40℃。
(2)梯度乙醇脱水剂每星期更换一次,组织块约为1000~1200块。方法是将第二缸的80%乙醇倒弃,以后的95%乙醇和无水乙醇依次前移。只将最后 一缸的无水乙醇更换为新液。这样更换不但节约了乙醇,更重要的是如果脱水剂全部更换为新液就会产生过脱水,组织发脆。经过几次脱水后的乙醇,浓度虽然只降 低了5%~10%,但脱水过程中置换出的细胞外液、组织液等可减弱乙醇的脱水能力。因此实际工作过程中须根据组织块的多少、脱水剂的使用时间合理设定脱水 剂的脱水时间、P/V循环和混合循环功能。
(3)透明剂二甲苯10~15天更换一次。第一缸二甲苯倒弃,第二缸前移至第一缸,第二缸更换为新液。二甲苯起媒介作用,将无水乙醇置换出又使石蜡很好地 浸入组织内。如果透明时间过长、强度过大(如P/V循环和混合循环全程使用)就会产生透明,以致组织发脆发干不利于切片。所以透明剂设定的时间、P/V循 环和混合循环的使用要有机配合。
(4)所用石蜡要干净无杂质,熔点58~60℃。使用一定时间后,倒弃二甲苯含量过高的第一缸石蜡,将后三缸石蜡依次前移,最后一缸换新鲜石蜡。石蜡温度设定为60℃,这样的温度可避免小标本浸蜡因温度过高而发脆。
(5)脱水机要放置干燥通风房间,防止阳光直射显示屏。最好配置一台不间断电源(UPS),防止瞬间断电影响机器使用。
(6)使用全自动密闭式脱水机要防止过脱水,过透明。