低背景的蛋白质银染(silver staining)方法

我们做蛋白质电泳的人都知道，银染色很灵敏，有很强的说服力，但通常胶背景较深，不易扫描。在这里介绍一下低背景的蛋白质银染方法。

Step Reagent Time/min

Fix 50%EtOH, 12%HAC, 0.1%HCHO, 38%H2O 60

Rinse 50% EtOH 5 min, 3 times

Sensitive 0.02% Na2S2O3 1 min

Rinse Double distilled H2O 1 min, 3 times

Silver 0.5% AgNO3, 0.075% HCHO(现用现加) 20 min

Wash* Double distilled H2O 1 min, 2 times

Develop 6% Na2CO3, 0.0004% Na2S2O3, 0.05% HCHO 4-15 min

Stop 50% EtOH, 12% HAC

*说明，此步中洗涤过程要控制好，时间太长，可能显色时间太长甚至染不出色；反之，时间太短，银没有洗干净，背景变深。但做几次以后就很快掌握了。