Invitrogen提供了大量的涵盖面广的蛋白分离预制胶，包括不同的成分，百分比浓度和格式。使用合适的胶百分比浓度，缓冲系统，上样孔格式以及胶的厚度，对于获得最好的结果非常重要。以下提供了帮助你选择适合你应用的正确凝胶的信息。
E-PAGE™ 96 High-Throughput System是整合的、无缓冲液系统，设计用来检测和分析大量的蛋白样品，时间仅仅需要14分钟。
NuPAGE® Novex Gels组合了完美的技术和极度的可靠性。货架期长达12个月，比其它蛋白凝胶需要的电泳时间更短，中性pH值，为大多数蛋白的分离和转移提供优良的性能。现在可以获得8个分离范围，分离绝大多数不同大小的蛋白。
Novex® Tris-Glycine Gels基于传统的Laemmli buffer system，可能被使用在所有鞍椎姆掷搿Ｍü齀nvitrogen公司可以获得12种不同百分比浓度和加样孔大小的凝胶。
Novex® Tricine Gels是分离肽和低分子量蛋白的理想凝胶。
Novex® Zymogram Gels使用gelatin或者casein作为底物分离活性蛋白酶，可以鉴定蛋白酶的大小和活性。
预制聚丙烯酰胺凝胶一般信息：
基质： 聚丙烯酰胺
厚度： 1.0mm或者1.5mm
大小： 8cm（h）x8cm（w）
cassette 大小： 10cm（h）x 10cm（w）
加样孔格式：17孔，15孔，12孔，10孔，9孔，5孔，1孔，2D/准备 孔或者IPG孔
堆积胶：大多数Novex® gels为4%堆积胶
* Novex®预制胶适用于XCell SureLock™ Mini-cell和大部分其它设计为10cm（h）×10cm（w）gel cassette的mini-cells。E-PAGETM预制胶适用于E-Gel® Base，E-Gel® PowerBaseTMv.4或者E－Base™单元。
选择合适的凝胶百分比浓度
一般而言，分离分子的大小应该决定你选择丙烯酰胺的浓度。使用低百分比浓度凝胶分离较大的分子，高百分比浓度的凝胶分离较小的分子。进行等电聚焦时，这条规则例外。参看凝胶迁移图发现最适合你应用的凝胶。通常，为了达到最佳的分辨率，分子应该移动通过凝胶长度的70％。当蛋白分子量范围宽或者未知，梯度胶通常是最好的选择。
选择加样孔格式和凝胶厚度
我们提供大部分聚丙烯酰胺凝胶为9孔的格式（17孔，15孔，12孔，10孔，9孔，5孔，1孔，2D/准备 孔或者IPG孔）。一些类型的凝胶可以得到两种厚度（1.0mm和1.5mm）。如果上样量大（＞30μl）时，使用较厚的凝胶（1.5mm）和较少的上样孔（5孔）更为合适。如果blotting，记住蛋白从1.0mm的凝胶中比从1.5mm的厚胶中更容易转移。表1总结了各种类型凝胶的特定和应用。使用表2确定哪一种上样孔格式最适合容纳你的样品量。
表1 选择使用胶的类型
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胶的类型 |
胶浓度 |
分离范围 |
货架期 |
平均电泳时间 |
应 用 |
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蛋白质分析 |
E-PAGE™ 96 |
6% |
10-200 kDa |
1年 |
14分钟 |
高通量、变性蛋白的分离，以进行重组生产分析和蛋白谱研究，可以电泳后染色和western blots |
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NuPAGE® Bis-tris |
10%,12%,4-12% |
1.5-300 kDa |
1年 |
35-50分钟 |
pH中性,12个月货架期凝胶。对于变性和还原蛋白具有优良的分辨率。是分析小到中等大小蛋白的最佳选择。 |
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NuPAGE® Bis-Acetate |
7%,3-8% |
30-400 kDa |
8个月 |
60分钟 |
8个月货架期的高性能凝胶。对于较大的蛋白效果极佳。也能够用来做非变性电泳（native）。 |
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Tris-Glycine |
4%,6%,8%,10%,12%,4-20%,4-12%,14%,16%,18%,8-16%,10-20% |
6-500 kDa |
1-2月 |
90分钟 |
准确和可重复的分离非变性（native）和变性蛋白。可以得到各种范围的Laemmli-style 凝胶。 |
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Tricine |
10%,16%,10-20% |
2-200 kDa |
1-2月 |
90分钟 |
小肽的分离 |
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IEF |
pH3-7，pH3-10 |
pI3.0-pI8.5 |
5月 |
150分钟 |
根据等电点分离可溶性蛋白。 |
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Zymogram |
10%(gelatin),12%(casein),4-16%(casein) |
30-200 kDa |
2个月 |
90分钟 |
利用casein 和gelatin作为底物，确定特别活性蛋白酶。 |
表2 获得最佳结果的推荐上样量
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聚丙烯酰胺凝胶 |
1孔 |
IPG孔 |
2D孔 |
5孔 |
9孔 |
10孔 |
12孔 |
15孔 |
17孔 |
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最大上样量/孔 |
1.0 mm厚度 |
700 µl |
7 cm IPG条 |
400 µl |
60 µl |
28 µl |
25 µl |
20 µl |
15 µl |
15 µl |
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1.5 mm厚度 |
n/a |
n/a |
600 µl |
n/a |
n/a |
37 µl |
n/a |
25 µl |
n/a |
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推荐获得最佳分辨率的最大上样量* |
每条蛋白带，考马斯亮兰染色 |
12 µg |
n/a |
12 µg |
2 µg |
0.5 µg |
0.5 µg |
0.5 µg |
0.5 µg |
0.5 µg |
注释：E-Gel® 要求20μl样品量/孔 。
*NuPAGE® 胶比Tris-Glycine 或Tricine有更高的蛋白上样能力。 |