血清总补体活性测定（CH50单位测定）

补体能使抗体致民敏的羊红细胞发生溶血反应,根据溶血程度可测定补体总活性。以溶血百分率作纵坐标,相应的血清补体量为横坐标绘图,可知在 50%溶血附近补体的量与溶血的程度呈直线关系。因此以50%溶血作为终点较以100%溶血作为终点更为敏感。故称为50%溶血试验,即 CH50（50%complement hemolysis）。产生50%溶血所需补体的量为一个CH50单位。

[实验材料]

待测患者血清

5%绵羊红细胞悬液

3μ/0.1ml溶血素

PH7.2巴比妥缓冲液或生理盐水

370C水浴箱、小试管、吸管等

[实验方法]

取小试管8支,依次编号；

1-6管加入巴比妥缓冲液0.2ml；

于第1管加入待测血清0.2ml,混匀后吸出0.2ml加入第2管 …… 依次对倍稀释至第6管,从第6管吸取0.2ml弃去,此时各管血清稀释度依次为1/2、1/4 、 1/8……1/64 ；

1-6 管加入巴比妥缓冲液 0.2ml,第7管加0.4ml,第8管加0.5ml ，

1-7加溶血素0.1ml ；

每管各加绵羊红细胞 0.1ml,轻轻摇匀,置370 C水浴箱30分钟,40C 冰箱过夜。

血清总补体活性测定操作表 单位： ml

6为实验测定管；第7管为溶血素对照管；第8管为绵羊红细胞对照管

50% 标准溶血管的配置：

取5%绵羊红细胞1ml,离心后弃上清,加入蒸馏水0.5ml,使红细胞全部溶解,再加双倍（1.7%）生理盐水0.5ml,混匀后加5%绵羊红细胞1ml。混匀取此液 0.1ml加巴比妥缓冲液0.5ml即为50%标准溶血管。

[实验结果]

以50%溶血管为标准,肉眼依次观察,与标准管最接近者为终点管。按下式计算1ml血清的补体单位。

血清中补体活性单位（CH 50 单位） = 1/血清总量×终点管稀释倍数

本法测得血清总补体活性的正常值为80-160CH50μ/ml

[注意事项]

待测血清要求新鲜，一般要求在去血后 2小时做完实验。

试管口径大小一致，清洁透明，便于观察。

50%标准溶血管配置必须用同批实验用绵羊红细胞，并同时方入冰箱。