谢浩 杨程 陈丽娥 (武汉理工大学生物科学与技术系，武汉430070) 摘要：多肽融合标签能够赋予目标蛋白新的特性，便于目标蛋白的定位、追踪、纯化以及结构和相互作用研究．但在很多情况下，尤其是研究蛋白质结构或分离纯化药用蛋白时，需要将多肽融合标签从融合...

5端非翻译区的二极结构影响到调控蛋白与帽结构的接近，阻碍40S前起始复合体的装配和在mRNA上的扫描，起负调控的作用。但若二极结构位于 AUG的近下游，（最佳距离为14 nt），将会使移动的40亚基停靠在AUG位点，增强起始反应。真核的系列翻译起始因子可使二极结...

原核生物基因表达的调控主要在转录水平上进行，而真核生物由于RNA较为稳定，所以除了存在转录水平的调控以外，在翻译水平上也进行各种形式的调控。 在蛋白质生物合成的起始反应中主要涉及到细胞中的四种装置,这就是:1.核糖体,它是蛋白质生物合成的场所;2.蛋白...

一般直接用SDS凝胶加样缓冲液裂解，具体方法如下： [试剂与设备] （1）表达待检测蛋白质的细菌。 （2）50mmoL／LTris-HCl（pH7.4）。 （3）2xSDS凝胶加样缓冲液： 100mmol／L TrisHCl（pH6.8） 200mmol／L 二硫苏糖醇（DTT） 4％ SDS（电泳级） 0.2％ 溴酚蓝...

经醋酸纤维、琼脂(糖)、聚丙烯酰胺电泳分离的各种生物分子需用染色法使其在支持物相应位置上显示出谱带，从而检测其纯度、含量及生物活性。蛋白质、糖蛋白、脂蛋白、核酸及酶等均有不同的染色方法，现分别介绍如下： 一、蛋白质染色 染色液种类繁多，各种染色...

原 理 以醋酸纤维薄膜为支撑物，浸入pH8.6的缓冲液后吸去多余液体。将微量血清点于膜上，电泳后，将薄膜置染色液中使蛋白质固定并染色，洗去多余染料。 操 作 1．准备与点样 (1)将薄膜切成2.58cm的小片。在薄膜无光泽面(正面)的一端约2cm处用铅笔划一线，以标...

原 理 将血清脂蛋白用脂类染料(如苏丹黑或油红O等)进行预染。再将预染过的血清置于琼脂糖凝胶板上进行电泳分离。通电后，脂蛋白向正极移动，并分离为几个区带。 操 作 1．预染血清：血清0.2ml加苏丹黑染色液0.2ml于小试管中，混合后置37℃水浴染色30分钟，然...

这个方法是以phenol 及chloroform 溶菌后直接进行电泳分析，并未将质体DNA与宿主细菌染色体DNA 分离，得到的DNA 也不能用限制酶作用。但因其快速简便，所以可藉的于短时间内检定大量转形株中质体DNA 的相对分子量，以初步筛选带有重组质体的转形株。 药品试剂...

一. 样品的制备 1. 设计引物。用Oliga6.0对目的基因进行分析，设定引物，引物长度18-21个碱基，扩增片段以200-300bp最为合适。 2. PCR扩增并检测。根据不同的引物挑选适合的退火温度进行PCR扩增。扩增产物用2-2.5%的琼脂糖胶跑水平电泳检测，上样量3-5ul。PCR...

一、准备工作 1、实验器具与材料： （1）移液枪：10ul （2）吸头：20ul （3）吸头台：放置200ul和20ul的吸头一个 （4）三角烧瓶：50ml一个 （5）琼脂糖 2、实验器具的处理与准备 （1） 塑料制品：（包括吸头等） 送至高压3次，试验前将枪头放入吸头台。 （2）...