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  • 不同分子量蛋白质的分离——凝胶管柱层析法(gel filtration colu2017-10-14 09:25:51

    实验原理 凝胶层析又称凝胶过滤,是一种按分子量大小分离物质的层析方法。该方法是把样品加到充满着凝胶颗粒的层析柱中,然后用缓冲液洗脱。大分子不能进入凝胶颗粒中的静止相中,只留在凝胶颗粒之间的流动相中,因此以较快的速度首先流出层析柱,而小分子则...

  • 离子交换层析法(ion exchange chromatography)分离氨基酸2017-10-14 09:25:05

    实验原理 离子交换层析法主要是根据物质的解离性质的差异而选用不同的离子交换剂进行分离的方法。各种氨基酸分子的结构不同,在同一pH时与离子交换树脂的亲和力有差异,因此可依据亲和力从小到大的顺序被洗脱液洗脱下来,达到分离的效果。 试剂和器材 一、试...

  • 更年安片薄层色谱鉴别原理和操作步骤2017-10-14 09:24:27

    一.目的要求 1掌握薄层荧光法的原理及操作。 2掌握薄层色谱法在中药制剂鉴别中的应用。 二.基本原理 更年安片由地黄、泽泻、五味子、制何首乌等药味组成,可利用薄层色谱法对五味子和制何首乌进行鉴别。五味子中主要有效成分为木脂素类,五味子甲素为其主要...

  • 气相色谱层析(gas chromatography)2017-10-14 09:23:46

    基本原理 混合样品的气流通过固定相时,根据各组分对固定相的吸附强弱不同使不同成分得到分离。气相色谱仪的基本流程,如图2-26。 气相色谱仪的基本部件 (1)载气 常用的载气主要有氮、氩、氢和二氧化碳等。这些气体一般都由高压气瓶供给 (2)进样器 气相色谱...

  • 亲和层析(Affinity Chromatography)(3)2017-10-14 09:23:07

    ⑥元素分析:如果配体中含有某种特别的元素,通过元素分析就可以确定配体结合量。 ⑦放射性分析法:偶联中加入一定量带有同位素的配体,通过放射性分析确定配体结合量,这是一种非常灵敏的方法。 影响配体结合量的因素很多,包括基质和配体的性质、基质的活化...

  • 亲和层析(Affinity Chromatography)(2)2017-10-14 09:22:28

    ⑵基质的活化 基质的活化是指通过对基质进行一定的化学处理,使基质表面上的一些化学基团转变为易于和特定配体结合的活性基团。配体和基质的偶联,通常首先要进行基质的活化。 ①多糖基质的活化 多糖基质尤其是琼脂糖是一种常用的基质。琼脂糖通常含有大量的...

  • 亲和层析(Affinity Chromatography)(1)2017-10-14 09:21:49

    亲和层析(Affinity Chromatography)是利用生物分子间专一的亲和力而进行分离的一种层析技术。人们很早就认识到蛋白质、酶等生物大分子物质能和某些相对应的分子专一而可逆的结合,可以用于对生物分子的分离纯化。但由于技术上的限制,主要是没有合适的固定配...

  • 层析方法:纸层析(paper chrmatography)2017-10-14 09:21:09

    纸层析是分配层析法的一种,其以滤纸为惰性载体,展层溶剂大多是由水饱和的有机溶剂组成。 滤纸纤维的OH 基的亲水基团可吸附有机溶剂中的水作固定相,有机溶剂作流动相,当流动相沿滤纸自下向上展开,称为上行层析;反之,流动相自上向下移动,为下行层析。...

  • 蛋白质DNS分析法DNS—Cl(膜层析技术)2017-10-14 09:20:31

    一、实验目的 1.掌握DNS 分析法测定氨基酸的原理与方法。 2.进一步熟悉薄膜层析的操作。 二、实验原理 荧光试剂二甲氨基萘磺酰氯即DNSCl(DansylCl),能与所有氨基酸的氨基结合,生成荧光物质DNS氨基酸。DNSCl 也能与蛋白质或多肽的游离氨基结合,生成DNS蛋白...

  • 氨基酸的纸层析(paper chrmatography)2017-10-14 09:19:51

    一、 实验目的 1.了解并掌握氨基酸纸层析的原理和方法。 2.学习纸层析法的操作技术,分析未知样品氨基酸的成分。 二、 实验原理 用滤纸为支持物进行层析的方法,称为纸层析法,它是分配层析法的一种。纸层析所用的展层溶剂大多是由水饱和的有机溶剂组成。滤纸...

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