1、培养用液： HBSS。含有10mmol/L Hepes 的无钙、镁离子的PBS（ph7.4）。 酶消化液。用HBSS配制，含0.025%胰蛋白酶和1mg/ml III型的胶原酶。 细胞分散液。含有1mg/ml BSA、10mmol/L hepes、50U/ml青霉素和50/ml链霉素、25ug/mlDNA酶1的L15培养基。 生长培养...

培养活细胞可用相差显微镜，也可用缩时摄影直接记录活细胞的动态变化，还可将离体活细胞染色。 一、相差显微镜直接观察法： 活细胞对光线是透明的，光线通过活细胞时，波长和振幅几乎没有改变，所以用普通光镜无法看清未经染色的活细胞。为了观察活细胞的结构...

用实体瘤研究诱导分化比白血病少，实体瘤细胞种类多，其特性不一，诱导分化判定标准各不相同，分化指标一般包括形态和功能的变化，增殖能力下降，致瘤性消失。具体实例有以下几种。 （一）人黏液表皮样癌MEC-1细胞分化诱导实验： MEC-1细胞是一种低分化黏液表...

细胞在体外进行培养，失去了机体的调节和控制，因此，除满足营养的要求外，还必须使细胞生存环境昼接近活体的环境。外环境的培养条件如温度、渗透压、酸碱度等均能影响细胞的生长。 一、温度： 一般哺乳类及禽类细胞体外培养的适宜温度是37~38℃。温度过高或...

体外培养的细胞，由于环境因子因素的影响，有时会发生自发转化，由原来的二倍体核型变成多倍体/异倍体核型，细胞的生长特性也随之发生改变而获得永生化，失去接触抑制，可无限繁殖传代。但之二中自发产生的转化不仅时间长，而且转化率极低，介于10-6-10-4之间...

七、碱性磷酸酶检测法（AKP法）： 1、按MTT法用细胞因子处理靶细胞适当时间，用PBS洗去死亡细胞，洗两次。 2、向96孔细胞培养板各孔中加0.2ml新鲜配制的底物液（0.2mol/L 硼酸，1mmol/L MgCl2，1.2mmol/L甲伞基磷酸）。在37℃ 5％ CO2的饱和水汽二氧化碳培养...

一、[3H]脱氧胸苷摄入法测定细胞数： 1、用RPMI-1640培养液洗涤对数生长期（培养3天）的CTLL-2细胞两次，每次250g离心10分钟，洗去培养液中残存的IL-2。 2、用台盼蓝（1％ Trypan blue）染色法计数细胞并决定细胞的活力，用10％小牛血清的RPMI-1640培养液悬浮...

1、集落的种类： 不同细胞来源的集落其形态和大小均有所不同. 2、各种集落的培养步骤： 各种造血细胞集落的培养条件有所不同，但其培养过程大致相似，操作步骤大致如下。 分离所要培养的细胞，制成单个核细胞悬液。 配制相应的培养体系。按比例将细胞因子、营...

收集浑浊带分离获得的淋巴细胞，用无钙、镁离子的PBS洗3次后，再用培养基洗1次后计数，分瓶培养。 此法分离获得淋巴细胞纯度高。 分离液的制备：9% Ficoll（20℃下相对密度约1.020）24份与33.4%泛影葡胺（用泛影钠或Conray400也可，在20℃下相对密度约1.200）...

以前认为红细胞、粒细胞、淋巴细胞、巨噬细胞等血细胞都属终末分化细胞，很难在体外培养生长或仅能短期培养而不能传代，近年来由于细胞培养技术的发展，已有血细胞培养成功的报道，正常血细胞在体外培养生长时间短，只有白血病细胞，血友病细胞、淋巴瘤细胞可...