收集浑浊带分离获得的淋巴细胞,用无钙、镁离子的PBS洗3次后,再用培养基洗1次后计数,分瓶培养。 此法分离获得淋巴细胞纯度高。 分离液的制备:9% Ficoll(20℃下相对密度约1.020)24份与33.4%泛影葡胺(用泛影钠或Conray400也可,在20℃下相对密度约1.200)...
以前认为红细胞、粒细胞、淋巴细胞、巨噬细胞等血细胞都属终末分化细胞,很难在体外培养生长或仅能短期培养而不能传代,近年来由于细胞培养技术的发展,已有血细胞培养成功的报道,正常血细胞在体外培养生长时间短,只有白血病细胞,血友病细胞、淋巴瘤细胞可...
1)用玫瑰花结形成试验分离E+细胞: 1.制备AET-绵羊红细胞: 1)在刻度离心管中,用无菌的含5%小牛血清的Hanks液洗涤绵羊红细胞3次,每次离心500g 10分钟。 2)吸净上清液,测量红细胞比容。轻击试管分散红细胞,加入4倍红细胞比容量、新鲜制备的AET溶液,...
乳腺主要由腺上皮组成,早期乳汁或断奶后的乳汁含有上皮细胞团块,可用离心法收集上皮细胞(混杂有巨噬细胞),培养时常用人胚小肠纤维细胞作饲养层,可抑制间质细胞生长。使用优化培养基可使用上皮细胞传代,并形成克隆,在胶原底物上要形成三维立体的复层结...
晶状体是一个双凸透镜状富于弹性的透明体。位于虹膜、瞳孔之后,玻璃体之前,借晶状体悬韧带与睫状体联系。晶状体后表面的凸度大于前面,是重要的屈光间质之一。晶状体囊膜是在胎生期内有晶状体上皮细胞分泌的具有基底性质的胶原弹性膜,是一层无细胞的透明薄...
1)细胞株的培养和传代 培养: 用于检测细胞因子的细胞株通常培养于含10%小牛血清和抗生素的培养液中,培养细胞因子依赖细胞株还有加入适量细胞因子。在37℃ 5% CO2的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养,3~4天传代一次。 悬浮生长细胞的传代: 直接吸去或离心...
①用于许多病毒中和试验、血凝试验、补体结合试验、凝集及沉淀反应的抗原,用组织培养之材料制备较为理想。 ②用于病毒中和试验的抗原不需要很纯,但是其感染性病毒于非感染性病毒之比值高。因后者可结合抗体,感染滴度高,这样经稀释后,即可除去大多数宿主...
骨骼肌细胞培养 1.杀死动物,无菌取大腿肌组织,切成0.3~0.5厘米小块。 2.用不含钙镁离子的Hanks液配的0.25%胰蛋白酶消化,无菌纱网或纱布滤过,合成培养基加10%小牛血清培养,为促进分化可加1%的胎汁。 3.细胞接种量为2106/皿,接种在胶原或明胶的底...
一、纺锤体阻断剂(Spindle inhibitor) 在有丝分裂过程中,随着纺锤丝的形成,染色体被牵引到一起难以观察其形态。纺锤体的形成在于细胞质和纺锤体成分的粘度之间的平衡,因此,改变细胞质的粘度,即可破坏纺锤体形成,从而使得染色体均匀散开,且染色体缢痕...
二、建立细胞系(或株)的要求 关于什么样的体外培养细胞群,可被确认为是已被鉴定的细胞(Certified Cells),国际上也尚无统一的规定,一般依具体情况而定。在只用作初代培养细胞,只要供体性别、年龄等均一,取材部位及组织种类等条件稳定,做鉴定的项目无...