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  • 分析PCR扩增的重要标准2017-10-14 16:08:03

    什么是PCR实验的灵敏度? 灵敏度指的是PCR扩增反应能够检测到目的基因的最小值。研究结果表明,影 响PCR扩增效率的因素,如模板的复杂程度与完整性、引物的纯度及其与模板的结合效率、反应温度、DNA聚合酶的热稳定性与扩增性能、反应缓冲液的离子组 成(主要指...

  • PCR操作时应注意的事项2017-10-14 16:05:47

    PCR检测微量感染因子时,容易因为污染的而导致各种问题,因此,进行PCR操作时,操作人员应该严格遵守一些操作规程,最大程度地降低可能出现的PCR污染或杜绝污染的出现。 (1)划分操作区:目前,普通PCR尚不能做到单人单管,实现完全闭管操作,但无论是否能够...

  • 碘化物缓冲液提取噬菌体单链DNA2017-10-14 16:04:02

    碘化物缓冲液: 10 mM Tris-HCl (pH 8.0), 1 mM EDTA, 4 M NaCl。室温避光贮存。不知道这里面哪个是需要避光的?我怎么没有提出DNA来,不知道是为什么?用的是NEB手册上写的方法。 1. 按上述方法进行噬菌斑扩增,在第一步离心后,将500 l含噬菌体上清转入一新...

  • 烈性噬菌体(virulent phage)和温和噬菌体(temperate phage)2017-10-14 16:03:19

    噬菌体(bacteriaphage or phage)是病毒的一类,结构很简单,基本上由一个蛋白质外壳包裹着一些核酸组成的。噬菌体的多样性来自于组成其外壳的蛋白质的种类,以及其染色体的类型和结构的不同。 (一)烈性噬菌体( virulent phage) 遗传学上应用最广泛的烈性...

  • 噬菌体展示技术2017-10-14 16:02:38

    1985年,Smith G P第一次将外源基因插入丝状噬菌体f1的基因Ⅲ,使目的基因编码的多肽以融合蛋白的形式展示在噬菌体表面,从而创建了噬菌体展示技术。该技术的主要特点是将特定分子的基因型和表型统一在同一病毒颗粒内,即在噬菌体表面展示特定蛋白质,而在噬...

  • 噬菌体侵染细菌的实验2017-10-14 16:01:52

    噬菌体是寄生在细菌细胞中的病毒.一个典型的噬菌体的生活周期,可以分为3个阶段感染阶段,增殖阶段和成熟阶段.有关的主要内容在课本上已经介绍过了,这里再稍加详述如下. 感染阶段 噬菌体侵染寄主细胞的第一步是吸附,即噬菌体的尾部附着在细菌的细胞壁上,然后进...

  • 细菌和噬菌体的遗传分析 42017-10-14 16:01:07

    (2)重组发生在部分二倍体中; (3)只出现一种重组子,不出现相反的重组子(如gal - 消失,只剩下gal + )。 三、噬菌体遗传分析 噬菌体是指浸染细菌、放线菌以及真菌的病毒。包括温和、烈性两种,都没有细胞结构,由一个蛋白质外壳包围一段DNA或RNA(烟草...

  • 细菌和噬菌体的遗传分析 32017-10-14 16:00:24

    方法: 苏氨酸 亮氨酸 叠氮化钠 噬菌体 乳糖 半乳糖 链霉素 Hfr: thr + leu + azi r ton r lac + gal + str s F - : thr - leu - azi s ton s lac - gal - str r 将 Hfr与F - 同时加入装有完全培养基的大 试管中,一定时间取样振荡,洗涤完全培养基,加至...

  • 细菌和噬菌体的遗传分析 22017-10-14 15:59:41

    转化过程可分为几个步骤: (1)双链DNA分子和细胞表面感受位点可逆性的结合; (2)供体DNA片段被吸入受体细胞; (3)侵入受体细胞的供体双链DNA转变成单链形式,其中的一条链被降解; (4)未被降解的一条链部分或 整个插入受体细胞的DNA 链,形成杂合的DN...

  • 细菌和噬菌体的遗传分析 12017-10-14 15:59:00

    遗传重组是生命的重要现象之一,在生物进化过程中起着极其重要的作用。从低等的原核生物到高等的哺乳动物其重组方式是多种多样的。真核生物中的遗传重组,主要是通过染色体上的基因自由组合或交换实现的,是生物有性生殖过程的一部分,形成的二倍性合子的遗传...

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