一、实验原理 SmIg 是B 细胞的抗原识别受体,也是B 细胞特异的表面标志,用直接免疫荧光法可检查出SmIg。用荧光素标记的抗Ig 抗体,在一定条件下与淋巴细胞混合,荧光素标记的抗Ig 抗体可以与B 细胞表面的Ig 结合,在荧光显微镜下观察可见B 细胞膜上出现荧光...
一、基本原理 溶血空斑试验,又称空斑形成细胞(Plague Forming Cell, PFC)试验,是一种体外检测抗体形成细胞的方法。将一定量洗涤过的绵羊红细胞注射入小鼠腹腔,四天后将小鼠杀死,取脾脏制成脾细胞悬液,内含抗体形成细胞。然后将脾细胞、绵羊红细胞,补...
ELISA是一种免疫测定。免疫测定(immunoassay,IA)是应用免疫学技术测定标本的方法。在临床检验中主要通过抗原抗体反应检测体液中的抗体或抗原性物质。 1.1 抗原 抗原是能在机体中引起特异性免疫应答的物质。抗原进入机体后,可刺激机体产生抗体和引起细胞免...
5-brdu 的分子量为307.1,将100mg分为三份30.7mg(0.1mmol),溶于1ml三蒸水,分装-20度保存。用的时候再稀释100倍,如在1ml 溶液里加入10ul即可。尽量分装为小剂量,如100ul,避免反复冻融使其活性降低。 1、BudR贮存液的配制 BudR 5mg(先用0.5ml 1N NaOH溶...
一、原理 荧光染料CFSE, 也可称为CFDA SE(5,6- carboxyfluorescein diacetate,succinimidyl ester) 即羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂,是一种可穿透细胞膜的荧光染料,具有与细胞特异性结合的琥珀酰亚胺脂基团和具有非酶促水解作用的羟基荧光素二醋酸盐...
一、材料及试剂 1、培养基:RPMI-1640或TC199培养液 2、PHA;同形态学方法 3、小牛血清 4、3H-TdR;选用比活性为2Mci~10Mci/mg分子的制品,将1Mci/ml溶液以生理盐水稀释成100uci/ml,于4℃保存备用。临用时再用培养液稀释成10uci/ml溶液。 5、3%冰醋酸 6、浓...
一、胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)渗入法 胸腺嘧啶核苷(TdR)是DNA特有的碱基,也是DNA合成的必需物质。用同位素3H标记TdR即3H-TdR作为DNA合成的前体能掺入DAN合成代谢过程,通过测定细胞的放射性强度,可以反映细胞DAN的代谢及细胞增殖情况。但是具有放射性。 二...
MTT分析法以活细胞代谢物还原剂3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide, MTT噻唑蓝为基...
正常细胞的磷酯酰丝氨(phosphatidylserine,PS)位于细胞膜内表面,细胞凋亡时翻转露于膜外侧,可与annexinV高亲合力结合。研究发现PS外翻为细胞凋亡的早期事件,先于膜通透性增加所51Cr或其他染料的释放。将效应细胞与靶细胞充分共育后,用PE结合的效应细胞...
Cell Counting Kit-8简称CCK-8试剂盒,是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。 WST-8是一种类似于MTT的化合物,在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的formazan。细胞增殖越多越快,则颜...