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  • 直接免疫荧光法测抗原2017-10-12 21:01:56

    基本原理 将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高,非特异性荧光染色少。缺点是敏感性偏低;而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体。此法常用于细菌、病毒等微生物的快速检查和肾炎活检、皮肤活检的免疫病理检查。...

  • 荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)原理2017-10-12 21:01:06

    2)标本变性 ①将制备好的染色体玻片标本于 50oC培养箱中烤片2~3h。(经Giemsa染色的标本需预先在固定液中退色后再烤片)。 ②取出玻片标本,将其浸在70~75oC的体积分数70%甲酰胺/2SSC的变性液中变性2~3min。 ③立即按顺序将标本经体积分数70%、体积分数...

  • 荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)原理2017-10-12 21:00:18

    实验原理 荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization FISH)是一门新兴的分子细胞遗传学技术,是20世纪80年代末期在原有的放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性原位杂交技术。目前这项技术已经广泛应用于动植物基因组结构研究、染色体精...

  • HRP标记抗体的方法(戊二醛二步法和简易过碘酸钠法) 22017-10-12 20:59:21

    (6)PH7.8饱和硫酸铵溶液及半饱和硫酸铵溶液。 (7)萘氏试剂及聚乙二醇(PEG,MW2000)。 (8)纯化的特异性抗体或抗Ig抗体。 (9)HRP(RZ3.0)。 (10)Sephadex G-25层析柱(2cm50cm)。 (11)搅拌器,分光光度计,离心机。 (12)透析袋,大、小烧杯,试管,...

  • HRP标记抗体的方法(戊二醛二步法和简易过碘酸钠法) 12017-10-12 20:58:37

    一、戊二醛二步法 1. 原理 戊二醛为一种双功能试剂,通过其醛基分别与酶和免疫球蛋白上的氨基共价结合,形成酶-戊二醛-免疫球蛋白结合物。 2. 标记步骤 (1)称取HRP25mg溶于1.25%戊二醛溶液中,于室温静置过夜。 (2)反应后的酶溶液经Sephadex G-25层析柱,...

  • 免疫荧光技术(immunofluorescence technique) 22017-10-12 20:57:48

    实验材料 1. 40 孔酶标板 2. 1:300 乙肝表面抗原溶液 3. 1:10 待测血清 4. 健康人血清 5. HBsAg 诊断血清 6. 辣根过氧化物酶标记羊抗人 IgG 抗体(酶标二抗) 7. 抗原稀释液( pH9.6 碳酸盐缓冲液) 8. 洗涤液( pH7.4 磷酸盐吐温缓冲液) 9. 血清稀释液(含...

  • 免疫荧光技术(immunofluorescence technique) 12017-10-12 20:42:15

    免疫荧光技术(immunofluorescence technique)是一种以荧光物作为标记物的免疫分析技术,荧光物质分子在特定条件下吸收激发光的能量后,分子呈激发态而极不稳定,其迅速回到基态时,可以电磁辐射形式释放出所有的光能,发射出波长较照射光长的荧光。用荧光素与...

  • 免疫荧光(Immunofluorescence, IF)实验方法2017-10-12 20:41:32

    免疫荧光技术是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。它是根据抗原抗体反应的原理,先将已知的抗原或抗体标记上荧光基团,再用这种荧光抗体(或抗原)作为探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体)。利用荧光显微镜可以看见荧光所在的...

  • 常用免疫组织化学染色方法 22017-10-12 20:40:49

    五)免疫组化双染色法。(ⅰ) (Ionmuno- Histochemistry double staimimg method) 1.切片脱蜡至水。 2.0.3%H2O2甲醇处理切片10分钟。 3.水洗。 4.抗原修复。 5.PBS洗3次,每次1分钟。 6.加入非免疫性动物血清,孵育 10分钟。 7.PBS洗3次,每次2分钟。 8.加入第...

  • 常用免疫组织化学染色方法 12017-10-12 20:40:03

    一)、ABC法: (注,下面各种方法,均为手工操作,如没特别说明,均在室温下进行) 1.切片经二甲苯Ⅰ 5分钟。 2.切片经二甲苯Ⅱ 5分钟。 3. 无水酒精Ⅰ 30秒。 4. 无水酒精Ⅱ 30秒。 5. 95% 酒精Ⅰ 30秒。 6. 95%酒精Ⅱ 30秒。 7. 90%酒精 30秒。 8.80%酒精 30...

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