作者:中华医学网
发布时间:2017-10-16 08:08浏览:
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1、更高、更灵活的通量
384孔杂交芯片,每孔可同时检测12个SNP位点。每日检测通量可达4,608-800,000 个SNP 位点。384孔板上的每一个孔内都预先固定了12个序列已知的独特的寡核苷酸片段及4个对照标记(Tag)。板上的每一个Tag片段都能与12个含有 Tag互补序列的SNP延伸引物中的一个互补,再加上4个对照的寡核苷酸片段,以确保结果的准确性。单碱基引物延伸反应完成后,将被转移到已含有特定寡核苷酸序列的微阵列芯片板上,由于Tag芯片技术能够严格按照已知的Tag序列设定杂交条件,所有杂交反应都是动态的液相杂交,良好的均一性和引物的高度特异性使得Tag芯片拥有比其它SNP筛查技术更高的准确性、杂交效率及重现性。
2、真正的多重SNP检测
每对PCR引物及一个SNP引物都由网络版的Autoprimer.com自动引物设计软件来完成。该软件可同时完成12对PCR引物及12个 SNP引物的设计以保证多重SNP检测的成功。每个完成的SNP引物都自动接有特定的Tag标签序列,此序列与预先种植在每个384孔板内的寡核苷酸探针序列互补,以便进行SNP位点的精确检测。
3、更低的成本,更高的效率
5ml的反应体系、12重的PCR反应及复合的SNP反应不仅仅降低了PCR反应的费用,还提高了效率,其最终的结果既保证了结果的一致,又可使每个SNP基因分型的成本降到最低。一个PCR反应可同时检测12个SNP位点,省时、省钱、省人力。
4、更少的DNA 用量,更精确的基因分型
2ng 的DNA可用于12个SNP 位点的检测,准确率在99%以上。由于单个延伸的碱基带有荧光标记,检测结果可由荧光芯片扫描仪上的双色荧光读出并分析。
由于SNP位点在基因组中数量多,分布稳定,且是一种双等位基因标记,易于使用高通量、自动化的技术平台检测。相信这一技术一定会在个体识别、复杂疾病研究和药物遗传学研究中发挥应有的作用。
欧洲正在研发的悬臂阵列
2000 年4月的《科学》杂志(Science,vol 288)报导了瑞士苏黎世 IBM 实验室和巴塞尔大学的一项新成果:使用由硅制的微小机械可以测出DNA的缺陷,对未来医学治疗和病理诊断设备的开发具有深远意义。
如此微小的机械也可称作生物芯片(biochip)或生物传感器(biosensor)。其理论是,直接将特定的生化识别转化为纳米机械运动,机械运动将被由不同机理集成化的监控器所观测,计算机将对其观测的光信号或电信号进行比较分析,从而达到对生化分子的识别及其它特定化学反应的监控。其生物传感器中感应部分常用的一种是悬臂传感器(cantilever sensor)。(图1)
悬臂的大小决定了其传感器的灵敏性,现有的硅纳米刻蚀技术可制造出宽度小于50纳米的悬臂,当器件尺度缩小到纳米级的时候,灵敏度将会大幅度提高。通过覆盖具有选择吸附性材料于表面,约束目标对象的悬臂就具有高度灵敏性的选择化学与生化物的传感器。当传感器被目标物质所接触,其表面应力发生改变,致使悬臂发生弯曲,并且通过检控打在器件表面的激光反射光路,从而得到监控信号,其信号将被用来进行物质识别,同时能非常精确的测出其含量,并且可以进行动态化学反应监控(图2)。
欧共体的另一个利用悬臂的传感器项目NANOMASS,由瑞典、丹麦和西班牙等多个研究所合作开发新型传感器,代替对表面应力的测量,通过检控悬臂频率来实现,不同的分子吸附表面将会改变悬梁的共振频率,恰恰共振频率的改变可用来进行物质的质量识别,其纳米机械设备将集成于CMOS的芯片上,且无须激光之类的光学检控系统,并且利用半导体芯片生产技术来提高其传感器的集成化与智能化。
悬臂传感器将传统的化学反应直接从微米至纳米的机械器件上测出无标记(lable-free)传感器,这种方法直接减少了生物分子检测的步骤和排除标记基体对样品结果的影响。此传感器的一个很大优势是可以对混合物进行检样与分析,无须花时间进行纯化分离,并且与人造智能网络连接,可以用电子鼻识别复杂混合气。并且有广阔的应用领域如医学诊断、药物研发、生命科学研究、食物分析、芳香味道分析和环境检控等。生命科学与半导体电子技术的结合将会使智能电子医生成为现实。