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核糖核酸的测定

作者：中华医学网发布时间：2017-10-14 09:31浏览：次

【实验原理】

RNA分子中的核糖在浓酸中加热，脱水转变成糖醛，后者在氯化铁存在下，与地衣酚试剂（3，5-二羟基甲苯）反应，缩合成绿色化合物，在670nm处有最大吸收峰，从而可进行定量测定。待测样品中的RNA浓度在20～200µg/mL之间时，其吸光度与浓度成正比。反应式如下：

核糖糖醛绿色化合物

【实验内容与方法】

1．取中试管3支，按表2-17操作

表2-17 RNA的测定方法

试剂（mL）	标准管	标本管	空白管
RNA标准液	1.0
RNA提取液		1.0
蒸馏水			1.0
地衣酚试剂	3.0	3.0	3.0

2．混匀各管置于沸水浴中加热10min，取出冷却，以空白管调零点，在670nm波长处比色，读取各管的吸光度。

3．计算

【实验准备】

1． RNA标准液准确称取RNA用0.001mol/L NaOH配制成100mg/mL的溶液。

2．地衣酚试剂称取地衣酚（3，5-二羟基甲苯）100mg，溶于100mL浓盐酸（AR）中，再加入100mg FeCl3.6H2O。应用前新鲜配制。

3．仪器：紫外可见分光光度计、试管、刻度吸管

核糖核酸的测定

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